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        T、B淋巴细胞及其亚群分离

        实验分类:

        免疫学实验

        最新修订时间:

        简介

        分离获得的单个核细胞中含有单核细胞、NK细胞、T及B淋巴细胞等,不同的实验常需要再从中分离不同的细胞群体,不同细胞群体常需采用不同的方法获得。


        对所分选细胞的T、B淋巴细胞亚群的选择性分离和纯化技术是免疫学研究和应用中最常用的实验之一。这些方法的选择仍要根据所开展的研究,所需要分离的细胞不同做不同的选择。


        比如小鼠T淋巴细胞可以采用尼龙棉柱法富集,也可采用细胞毒实验去除淋巴细胞中的B细胞以及单核巨噬细胞等辅佐细胞。此外,人T淋巴细胞还可采用花环形成分离法获得。


        当然,应用免疫磁珠法或流式细胞术分选免疫细胞亚群应该是最理想的方法,尽管价格比较昂贵,仍受到青睐并已得到推广应用。

        原理

        尼龙棉柱法富集T淋巴细胞的基本原理是利用T、B淋巴细胞以及辅佐细胞包括单核巨噬细胞等对尼龙棉不同的黏附特性,将T细胞分离出来(因B细胞和辅佐细胞易于黏附于尼龙棉纤维表面,而T细胞的黏附力较弱)。


        补体介导细胞毒剔除B细胞及辅佐细胞富集T细胞的基本原理是应用抗MHCII类分子的抗体与脾脏等来源的小鼠单个核细胞中表达MHCII类分子的细胞结合后形成抗原-抗体复合物,再加入新鲜补体以杀伤这些细胞,就可以获得富集的T淋巴细胞。

        来源:丁香实验团队

        操作方法

        尼龙棉柱法富集T淋巴细胞

        T、B淋巴细胞亚群的选择性分离和纯化技术是免疫学研究和应用中最常用的实验之一。尼龙棉柱法常用于小鼠T淋巴细胞的收集。

        补体介导细胞毒剔除B细胞及辅佐细胞富集T细胞

        T、B淋巴细胞亚群的选择性分离和纯化技术是免疫学研究和应用中最常用的实验之一。这些方法的选择仍要根据所开展的研究,所需要分离的细胞不同做不同的选择。可以采用细胞毒实验去除淋巴细胞中的B细胞以及单核巨噬细胞等辅佐细胞来获得T淋巴细胞。

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