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        脂肪代谢产物分析

        实验分类:

        蛋白质实验

        最新修订时间:

        简介

        脂肪代谢是机体能量供应的重要来源,脂质的合成与分解失衡则引发脂质代谢紊乱。脂肪酸合成增多,氧化分解降低,会导致细胞内脂质积累。脂肪细胞的积累是肥胖病的基础,也是糖尿病、动脉粥样硬化、肿瘤和心血管疾病等多种疾病发生的重要危险因素。

        目前用于脂肪代谢产物分析的方法主要有 2 种:脂肪酸合成酶活性测定和脂质含量检测。


        原理

        脂质含量检测的基本原理是:脂肪酸合成酶(fatty acidsynthase,FAS)是脂肪酸合成的关键酶,在哺乳动物肝、肾、脑和乳腺以及脂肪组织中较为丰富。FAS 在正常组织中的表达处于较低水平,而在恶性肿瘤细胞中的表达异常增高。乙酰 CoA 和丙二酰 CoA 在脂肪酸合酶的催化下消耗 NADPH,生成长链脂肪酸,所以 NADPH 的减少量与 FAS 的活性和含量成正比,通过 340nm 下检测 NADPH 含量的变化,即吸光度的减少量可反映出 FAS 的活性。

        脂溶性染料能溶于组织和细胞中的脂类,在脂类中的溶解度比在溶剂中大。当组织切片置入染液时,染料则离开染液而溶于组织内的脂质(如脂滴)中,使组织内的脂滴呈橘红色。油红 O 属于偶氮染料,是很强的脂溶剂和染脂剂,与甘油三酯结合呈小脂滴状,故可用于组织和细胞的脂质含量分析。

        来源:丁香实验团队

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