酪氨酸激酶分析实验

实验分类：

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

蛋白激酶的分析是使用标记的供体底物，当酶样品中含有磷酸转移酶活性时，蛋白质或多肽受体底物中标记物的积累就很容易被检出。

内容来源于《精编分子生物学实验指南（第五版）》

来源：丁香实验

操作方法

基本方案

1. 4℃ 最大速度离心 5 min 相当于 100 μg 兔肌肉烯醇化酶的样品，弃上清。2. 加 10 μl 1 mmol/L DTT/50 mmol/L HEPES， pH 7.0，充分混匀，冰浴 30～60 min。3. 加 10 ml 甘油，混匀。如果后续实验在当天进行，可保持在冰浴中，否则 - 70℃保存。4. 临实验前加入 20 μl 100 mmol/L 乙酸充分混匀，30℃ 水浴，