环核苷酸依赖性蛋白激酶分析实验

实验分类：

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

蛋白激酶的分析是使用标记的供体底物，当酶样品中含有磷酸转移酶活性时，蛋白质或多肽受体底物中标记物的积累就很容易被检出。

内容来源于《精编分子生物学实验指南（第五版）》

来源：丁香实验

操作方法

基本方案

1. 每个分析反应按以下比例将反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中，保持冰浴：5 × 环核苷酸依赖性蛋白激酶反应缓冲液1 μl 10 mg/ml 组蛋白 2B1 [γ-32P] ATP 溶液（ATP 终浓度为 5 μmol/L，放射活性为 5 μlCi/μl）1 μl 20 × 环核苷酸0～13 μl 水盖好离心管，混匀，放入 30℃ 水浴。每一反应做三份并设立无底物、酶、环核苷酸等各组分的实