二次鉴别性消化法检测磷酸肽中特定氨基酸实验

1. 在微量离心管中用 50 μl 合适的缓冲液溶解洗脱下的磷酸肽，短暂离心在管底收集所有的溶液。取 1 μl 肽溶液滴加到 pH 试纸上检测其 pH，确保最终的 pH 适宜于酶的活性。如果加入肽后溶液的 pH 发生剧变，调整好 pH 后再加入酶。2. 取出一部分（通常为 50%）样品，作为未消化的对照和作为与消化样品混合的一部分。3. 加入 1～2 μg 酶到待消化的样品中，涡旋振荡，短暂离心使