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        人造锌指蛋白的设计和合成实验

        实验分类:

        蛋白质实验

        最新修订时间:

        简介

        在 DNA 结合模体中,(Cys)2(His)2 类型的锌指模体具有大的操控潜力。为新的 DNA 结合蛋白设计,锌指模体提供了有吸引力的框架。特别是为产生新的、具有全新的 DNA 结合特性的,如长 DNA 链识别、DNA 弯折和 AT 富集序列识别——人造锌指蛋白。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。

        来源:丁香实验

        操作方法

        人造锌指蛋白的设计和合成

        本节描述的方法大概包括: ( 1 ) 设计的锌指蛋白的表达和纯化。 ( 2 ) 人工锌指设计技巧。 ( 3 ) 人工锌指构建步骤。 ( 4 ) 锌指结构和金属配位的确认。 3.1 人工锌指蛋白的表达和纯化 设计的人工锌指蛋白的表达和纯化方法在 3.1.1 和 3.1.6 节描述,包括: ( 1 ) 表达载体 pEV-3b 的构建; ( 2 ) 蛋白质以可溶和不可溶形式表达; (

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