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        免疫球蛋白标记技术

        实验分类:

        蛋白质实验

        最新修订时间:

        简介

        免疫标记技术是用特定的物质标记抗原或抗体进行的抗原抗体反应。可借助各种仪器观察结果或进行自动化测定,可在细胞、亚细胞、超微结构及分子水平上,对抗原抗体反应进行定性和定位研究;或应用各种液相和固相免疫分析方法,对液体中的抗原、半抗原或抗体进行定性和定量测定。

        来源:丁香实验

        操作方法

        酶标记抗体

        一、酶制剂及其底物 凡无毒性又能呈现有色化学反应的酶,原则上均可作为标记用。但作为标记抗体用的酶应满足下列要求 1. 来源方便,易于纯化; 2. 比活性高,性质稳定; 3. 酶活性和量能用简单方法测定。 目前在免疫酶技术中常用的酶为辣根过氧化物酶(HRP)和硷性磷酸酶(AP),其次还有葡萄糖氧化酶,β-半乳糖苷酶、溶菌酶和苹果酸脱氢酶等。    由于辣根过氧化

        荧光素标记抗体技术

        1. 将纯化的IgG抗体对PH9~9.5碳酸盐缓冲液透析过夜,透析后抗体液移入小烧杯中                     2. 称取适量IFTC,加入二甲亚砜(DMSO)(FITC~1 mg/1 ml DMSO),使终浓度为1 mgFITC/1 mlDMSO      FITC/IgG比例 如IgG浓度为1 mg/ml,FITC/IgG比例约为50 μgFITC/mgIgG

        125I标记单克隆抗体技术

        1. 在细胞冻存管内加入纯化的McAb100 μg/100 μl,再加入10 μl 0.05 M磷酸缓冲液,再加入10 μl(含1 mCi)125I            2. 加入10 μl氯胺-T(5 mg/ml溶于0.05 M磷酸盐缓冲液),孵育时间不超过30秒               3. 加入100 μl偏重亚硫酸钠(1.2 mg/ml溶于0.05 M磷酸缓冲液)

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