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        醋酸纤维素膜电泳分离鉴定蛋白质实验

        实验分类:

        蛋白质实验

        最新修订时间:

        简介

        混合蛋白质样品中各种蛋白质的等电点不同, 在pH8 . 6 的巴比妥缓冲液中, 各种蛋白质所带的静电荷量不同, 加上蛋白质分子大小不相同, 在电场中移动的速度也不等, 例如, 血清或卵清样品中白蛋白等电点比其他蛋白质低, 在pH8 . 6 时带的负电荷比其他蛋白质多, 加上白蛋白的分子较小, 因此在电场中比其他蛋白质移动速度快。这样, 样品中的蛋白质在醋酸纤维素膜上就可以形成区带, 可以分离和分析蛋白质组成等。本实验目的是掌握醋酸纤维素膜电泳的基本原理及点样技术和卧式电泳槽的使用方法。

        来源:丁香实验

        操作方法

        电泳法

        1. 膜的准备: 将醋酸纤维素膜切成8 cm×2 cm 条块( 或根据需要决定薄膜大小) , 在薄膜一端1 . 5 cm 处用铅笔轻轻画一条线( 点样处) , 浸入巴比妥缓冲液中至完全浸湿( 大概20 min 左右)。用镊子取出浸透的薄膜, 夹在两层滤纸中间, 轻轻按压,吸去多余的液体。 2. 点样: 用较尖的血色素吸管或其他点样管吸取样品2~3 μl 涂在玻片的一端截面上(玻片宽度应

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