纯化剪接因子 SR 蛋白实验

RNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

前体 mRNA ( pre-mRNA ) 剪接因子 SR（serine/argininc rich，富含丝/苏氨酸）蛋白家族是将剪接体组装到前体 mRNA 上的重要参与者。SR 蛋白是重要的剪接因子，该家族的不同成员可以在体外或体内指导选择性剪接位点的选择。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。

来源：丁香实验

操作方法

纯化剪接因子SR蛋白实验

一、材料与设备 1. 从细胞和组织中纯化 SR 蛋白家族 (1) 低速离心收集培养至对数生长中期的细胞，4℃ PBS 洗 2 次，离心收集细胞并保存于 -80°C 备用。以下制备实验通常使用6X109~ 8X1011 个 HeLa 细胞或 4X1010~5X1015 个果蝇 Kc 细胞。将细胞沉淀在液氮中研磨成粉末，注意在加入提取缓冲液之前应将研钵置于干冰上预冷。 (2) 动物器官和组织可用