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        光活化的核苷酸类似物介导的 RNA- 蛋白的交联实验

        实验分类:

        RNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        光化学交联技术是研究核搪核蛋内复合物中 RNA 与蛋白的相互作用的有效手段。 其基本原理是未经任何化学修饰的 RNA -蛋白天然复合物在短波长紫外线(254 nm ) 照射时,RNA 中的核苷酸和蛋白质中的氨基酸会产生光化学反应,转变为活性状态,进而形成分子间共价交联。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。

        来源:丁香实验

        操作方法

        光活化的核苷酸类似物介导的RNA-蛋白的交联实验

        ―、材料与设备 1. 全长含核苷酸类似物的 RNA 合成 所有的缓冲液配制均需采用经过蒸馏并灭菌的去离子水 (1) 缓冲液 A:20 mmol/L Tris-HAc ( pH 8.0 ),10 mmol/L Mg(Ac)2,50 mmol/L 谷氨酸钾。 (2) 5% (V/V) 甘油,40 mmoI/L Na2EDTA ( pH 8.0 ),40 μg/mL 乙酰化牛血清白蛋白,-20℃

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