mRNA 的 S1 作图实验

一、图片简介 二、实验步骤 1. 用1×碱性制胶缓冲液制备1.2%的低融点琼脂糖，并将凝固好的胶在1×碱性电泳缓冲液中浸泡过夜。 2. 将以下试剂混合以制备磷酰化的寡聚核苷酸： （1）20 μl ［γ-32P］ATP（10 mCi/ml，共200 μCi） （2）1 μl 100 μg/ml 寡聚核苷酸引物 （3）25 μl 10×多核

1. 对于18 μg DNA溶液，加入10×NaOH/EDTA溶液至1×的浓度，在室温放置5 min。 2. 加入1.5倍体积的1.5 mol/l pH4.5乙酸铵缓冲液中和。 3. 加2.5倍体积乙醇-70℃沉淀15 min，离心，沉淀用70%乙醇洗涤后，在Speedvac蒸发器中干燥5 min。 4. 重溶于55 μl 水中，替代M13模板步骤3中的单链模板进行其后的操作。