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        建立一个实时 PCR 定量分析实验

        实验分类:

        PCR 技术

        最新修订时间:

        简介

        对于一个新的靶分子建立实时 PCR 定量分析的过程包括:①设计步骤一 PCR 引物和探针的选择;②根据特定分析的要求,选择实时 PCR 的检測方法。使用 SYBRGreen 的实时 PCR 通常被用于优化引物,且被主要用于在研究中检测 PCR 产物 TaqMari 探针和分子信号提供了更好的特异性。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。

        来源:丁香实验

        操作方法

        建立一个实时 PCR 定量分析实验

        一、材料 1. 缓冲液和溶液 MgCl2(25 mmol/L) 探针(例如分子信号)或 SYBRGreen(MolecularProbes) 2. 酶和酶缓冲液 HotStmMix,2X(含有 TaqDNA 聚合酶、PCR 缓冲液和 dNTP) 3. 核酸和寡核苷酸 正向和反向扩增引物 模板 DNA 4. 专用设备 实时 PCR 仪 合适的反应管、毛细管或 96 孔的微量滴定

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