原位缺口平移技术
DNA 实验
别名：
in situ nick translation，原位缺口翻译
最新修订时间：
简介
原位切口平移技术又称为原位缺口翻译（in situ nick translation）。它最早用于研究DNA体外复制，其后又扩展至研究染色体、培养细胞与组织切片的DNA转录效力。
它一方面具有实感性，便于观察记录；另一方面也可作半定量（计数银颗粒）或定量（收集细胞作液闪测定）测定，其优点是显而易见的。
本技术是在分子水平上反映遗传物质的改变，因此其敏感性要比诸如染色体畸变、断裂、姊妹染色单体交换频率改变、微核形成以及碱洗脱法与荧光分析法敏感得多。
在实用上又有外加DNase I与不加DNase I两种。
前者主要用以区别有无转录活性或潜在转录活性的染色质或基因；而后者主要用于检测致癌物、致突变物或辐射等因子对细胞DNA的断裂损伤作用。
原理
原位切口平移技术的基本原理是大肠杆菌DNA聚合酶I（Escherichia coli DNA polymerase I）可从一条DNA链缺口（nick）的5＇端切除核苷酸，同时从缺口的3＇端连接核苷酸，并依次顺序进行，其结果切口沿DNA平移。
因此，新合成的数量可反映出DNA链的断裂（受损）的程度。原位缺口平移技术，乃是将缺口移位技术与同位素放射自显术结合起来，从而可在细胞核或染色体上反映出DNA受损的程度。
应用
原位切口平移技术常用于区别有无转录活性或潜在转录活性的染色质或基因、检测致癌物、致突变物或辐射等因子对细胞DNA的断裂损伤作用等。
来源：丁香实验团队
操作方法
原位切口平移技术又称为原位缺口翻译（in situ nick translation）。它最早用于研究DNA体外复制，其后又扩展至研究染色体、培养细胞与组织切片的DNA转录效力。它一方面具有实感性，便于观察记录；另一方面也可作半定量（计数银颗粒）或定量（收集细胞作液闪测定）测定，其优点是显而易见的。本技术是在分子水平上反映遗传物质的改变，因此其敏感性要比诸如染色体畸变、断裂、姊妹染色单体交换频率改
关于丁香通
公司信息
个人用户
企业机构
