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        利用化学诱变剂诱变基因组

        实验分类:

        DNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        当前利用模式小鼠研究基因功能主要有两个策略:基因驱动法(gene-driven approach)和表型驱动法(phenotype-driven approach)。基因敲除是典型的基因驱动法,采用此法产生一个基因敲除小鼠大约需要 1 年半的时间,而且只能对已知序列的基因进行操作,不能适应现代生物学高效率、高通量的需要。表型驱动法是指利用化学试剂在较短时间内诱导动物产生大量随机突变表型,或者通过转座子技术产生基因组整体突变,通过筛选获得具有特殊表型的动物并鉴定其遗传基础。


        原理

        基因组诱变的基本原理是自发突变由 DNA 复制、基因转录和 DNA 损伤修复等过程中的碱基错配、缺失或重复等产生;诱发突变通常由各种诱变剂所引起。


        来源:丁香通实验团队

        操作方法

        利用ENU诱变模式生物基因组

        乙酰基亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)是目前最常用的小鼠诱变剂,它是一种烷化剂,可以将其乙烷基转移到 DNA 碱基的氧原子或氮原子上,导致碱基错配或碱基置换。由于雄鼠生殖细胞的突变率及后代的数量远远大于母鼠,故一般用 ENU 处理雄鼠。突变率最高的是有丝分裂前的精原干细胞,单个位点的突变率可以达到 (6 - 1.5~undefined103,相当于筛选 175 - 655 个配子可以

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