质粒提取

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

从细菌中提纯质粒DNA

原理

强碱性条件下，质粒DNA和基因组DNA同时从细胞中释放出来，并发生变性。在pH中性，并有高盐浓度存在的条件下，质粒DNA会迅速发生复性，仍为可溶性状态，染色体DNA之间交联形成不溶性网状结构，在去垢剂SDS作用下，染色体DNA与变性蛋白质和细胞碎片结合形成沉淀，通过高心去除沉淀后，再用酚氯仿抽提进一步纯化质粒 DNA，用异丙醇或乙醇沉淀可将之纯化出来。

应用

质粒提取

来源：丁香实验

操作方法

碱裂解法（质粒提取）

（一）细菌培养物的生长；（二）细菌的收获和裂解；( 三) 质粒DNA 的纯化