四环素控制系统诱导基因表达实验

实验前准备详见「其他」。1. 用完全 DMEM-10 培养基培养细胞。转染前一天，用完全 DMEM/tet 培养基接种适量的细胞于 10 cm 组织培养皿中，使在转染时细胞生长至 1/3 汇片。 此后，细胞的培养都要含 0.5 μg/ml tet。每次转染需要一个培养皿。一个典型的实验应该包括 tTA 对照培养皿、tTA 和靶基因对照培养皿，以及非转染对照培养皿。2. 转染之前使质粒线性化，调节质

实验前准备详见「其他」。1. 用选择培养基（500 μmol/L L-组氨醇）培养可诱导表达 tTA 的稳定细胞系。转染前 1 天，用选择培养基（500 μmol/L L-组氨醇）接种适量的细胞于 10 cm 组织培养皿中，使在转染时细胞生长至 1/3 汇片。2. 转染之前使质粒线性化，调节质粒浓度>0.5 mg/ml。3. 用 500 μl HeBS 在干净的 4 ml 聚苯乙烯管混合 1