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        含5’突出羟基端的 DNA 分子磷酸化

        实验分类:

        DNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        本方案用磷酸酶去除核酸的 5' 磷酸根,然后在 T4 噬菌体多核苷酸激酶的催化下,以放射性标记的形式重新将磷酸加到核酸上,这是一种广泛应用于 32P 标记探针的技术。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

        来源:丁香实验

        操作方法

        含5’突出羟基端的DNA分子磷酸化

        一、材料 1. 缓冲液和溶液 乙酸铵(10 mol/L) EDTA ( 0.5 mol/L,pH 8.0 ) 乙醇 2. 酶和缓冲液 T4 噬菌体多核苷酸激酶 10X T4 噬菌体多核苷酸激酶缓冲液 3. 核酸和寡核苷酸 DNA (10~50 pmol) 4. 放射性复合物 [γ-32P] ATP ( 10 mCi/ml,比活性为 3000~7000 Ci/mmol) 5.

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