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        定量PCR

        实验分类:

        DNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        定量PCR可以用于:

        (1)以外参或内参为标准,通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测,进行PCR起始模板量的定量;(2)用外标法(荧光杂交探针保证特异性)通过监测PCR过程(监测扩增效率)达到精确定量起始模板数的目的,同时以内对照有效排除假阴性结果(扩增效率为零)。

        来源:丁香实验

        操作方法

        定量PCR

        一、材料1. 缓冲液与溶液10X 扩增缓冲液4 种 dNTP 贮存液(20 mmol/L,pH 8.0)MgCl2 ( 50 mmol/L)胎盘 RNase 抑制剂(20 单位/ul)2. 酶与缓冲液合适的限制性内切核酸酶反转录酶(100~200 单位/ul)热稳定 DNA 聚合酶3. 放射性物质[α-32P] dCTP(放射性比活度:3000 Ci/mmol) 的浓度为 10 mCi/mI4.

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