Northern 杂交

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

转移并固定到膜上的 RNA 样品可以与特异的探针杂交，从而用来对所感兴趣的 RNA 进行定位。视实验人员和条件的差异，可以从多种方法中选择任意一种来标记和检测探针。用抑制非特异吸收探针的封闭试剂处理膜之后，在适于探针和固定的靶 RNA 杂交的条件下将膜同探针孵育，而后广泛洗膜以去除非特异结合的探针，最终在膜上产生一个紧密结合探针的影像分布。分析了杂交结果之后，探针可以从膜上洗去，膜可重复使用于下一个实验。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

Northern杂交

一、材料 1. 缓冲液和溶液预杂交液（0.5 mol/L pH 7.2)，7% (m/V) SDS，1 mmol/L EDTA ( pH 7.0)） SSC ( 0.5X，1X，和 2X ) 含 0.1% (m/V) SDS SSC ( 0.1X 和 0.5X）含 0.1% (m/V) SDS 2. 核酸和寡核苷酸 DNA 或 RNA 探针（> 2X108 cpm/μg）固