变性 RNA 在膜上的转移和固定

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

多数情况下，为检测特定的靶 mRNA，需先将 RNA 通过琼脂糖电泳分离后，再从胶上转移到二维支持物上，（通常用尼龙膜)，再与持异的标记探针杂交。正如在 Nonhem 杂交中讨论的情况，实验者可采用多种试剂和膜用于 RNA 的转移以达到 RNA 和膜紧密结合的效果。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

变性RNA在膜上的转移和固定

一、材料 1. 缓冲液及溶液含 0.5 μg/ml 溴化乙锭的 0.1 mol/L 乙酸铵亚甲蓝溶液（0.02% 亚甲蓝（Sigma，89% 纯度）溶于 0.3 mol/L 乙酸钠（pH 5.5) ）浸润液含 1% SDS (m/V) 的 0.2XSSC 20X SSC 转移缓冲液 2. 核酸和核糖体 RNA 样品，琼脂糖电泳分离 3. 专用设备印迹滤纸（Schle