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        用缠绕法从哺乳动物细胞中分离 DNA

        实验分类:

        DNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        本方法由 Bowtell 法(1987) 改进而成,可同时从许多不同细胞或者组织样品中制备 DNA。本方案中的主要步骤包括将 DNA 沉淀在细胞裂解液和乙醇的交界面上,接着将沉淀的 DNA 缠绕到一个 Shepherd 氏钩上。缠在钩上的 DNA 从乙醇溶液中转出溶于所选择的液体缓冲液。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

        来源:丁香实验

        操作方法

        用缠绕法从哺乳动物细胞中分离DNA

        一、材料 1. 缓冲液和溶液 细胞裂解液(6 mol/L 盐酸胍,0.1 mol/L 醋酸钠(pH 5.5)) 乙醇(室温) TE ( pH 8.0) 2. 凝胶 脉冲电场凝胶或 0.6% 琼脂糖凝胶 3. 核酸和寡核苷酸 λ 噬菌体的线性单体和多联体 4. 专用设备 Kimwipe 吸水纸 聚丙烯管(50 ml) 振荡平台 Shepherd 氏钩(替代透析的一种选择)

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