解链温度的实验测定

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

寡核苷酸与靶序列杂交的解链温度可以用本章概述介绍的方法计算（见本章概述有关解链温度与杂交温度），也可通过实验测定双链 DNA 不可逆解离的温度（Ti) 来确定解链温度 Tm。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）上册，作者：黄培堂。

来源：丁香实验

操作方法

解链温度的实验测定

材料溶液和缓冲液稀释贮存液至适当浓度。变性液（仅适用于双链靶 DNA) 1.5mol/L NaCl 0.5mol/LNaOH 中和缓冲液（仅适用于双链靶 DNA) 0.5mol/LTris-Cl(pH7.4) 1.5mol/LNaCl 寡核苷酸预杂交液 6XSSC(或 6XSSPE) 0.01mol/L 磷酸钠（pH6.8) 1 mmol/LEDTA(pH8.0) 5xDenherd