薄层层析法测定氯霉素酰基转移酶含量实验

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本方案中，我们列出了三种不同的分析方法，可以用来测定报道基因载体 pCAT3 转染哺乳动物细胞后表达的 CAT 酶活性（请见图 17-3）。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

薄层层析法测定氯霉素酰基转移酶含量实验

材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的组分请见附录 1。贮存液稀释到适当浓度。 CAT 反应混合物 1 1mol/LTris-Cl(pH7.8)50ul [14C] 氯霉素 (60mCi/mmol, 用水稀释到 0.1mCi/ml)10ul 乙酰辅酶 A(新鲜配制，水溶液浓度 3.5 mg/ml)20ul 每测定 50ul 细胞裂解物需要准备 80ulCAT 反应混合物。反应混合物在临用