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        直链淀粉树脂亲和层析纯化麦芽糖结合融合蛋白实验

        实验分类:

        DNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        亲和层析方法几乎可以将麦芽糖结合融合蛋白纯化成单组分。麦芽糖结合蛋自(MBP) 是一个由大肠杆菌 malE 基因编码的周质蛋白,是细菌麦芽糖转运系统的成员之一。MBP 能结合微摩尔水平的麦芽糖和麦芽糊精,因此可用交联了麦芽糖的琼脂糖进行纯化。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

        来源:丁香实验

        操作方法

        直链淀粉树脂亲和层析纯化麦芽糖结合融合蛋白实验

        材料 缓冲液和溶液 贮存液、缓冲液和试剂的成分参见附录1。 贮存液稀释至适当浓度。 细胞裂解缓冲液(~150 ml) 30 mmol/LTris-Cl(pH7.l) 0.1 mmol/LEDTA 20%(m/V)蔗糖 细胞洗涤缓冲液(~250 ml) 10 mmol/LTris-Cl(pH7.1) 30 mmol/LNaCl 柱洗脱缓冲液(~100 ml) 10 mmol/LTris-C

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