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        中等量细胞克隆的杂交法筛选实验

        实验分类:

        DNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        这一方法适用于任何大小的细菌克隆,但小的克隆可以给出最清楚的结果。小克隆可以产生尖锐的杂交信号,而且在克隆从琼脂板转到膜的过程中不会弥散。操作中采用能够包含 2500 克隆的 90 mm 板效果最好。在保证没有气泡的情况下,用更大的滤膜很难正好覆盖于 150 mm 板。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

        来源:丁香实验

        操作方法

        中等量细胞克隆的杂交法筛选实验

        一、材料 1. 培养基 (1) 含有适当抗菌素的 LB 或 SOB 琼脂板(90 mm)。 本方案中使用 2~3 天的旧板效果最好,因为旧板更容易吸收接种物中的水分。 (2) 含有氯霉素的 LB 或 SOB 琼脂板。 氯霉素贮存液浓度应为 170~200 μg/ml。 2. 专用设备 (1) 硝酸纤维素膜(Millipore HATF,或相当产品)或尼龙膜,无菌无去污剂污染。 (2

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