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        用 T7 噬菌体 DNA 聚合酶进行双脱氧测序反应实验

        实验分类:

        DNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        本方案参照了 Tabor 和 Richardson(1987a,1989b,1990) 的方法,采用单链 DNA 模板进行 DNA 测序(有关单链 M13 噬菌体和质粒 DNA 制备,请参见第 3 章的方案 4、8 和第 12 章的方案 1)。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

        来源:丁香实验

        操作方法

        用 T7 噬菌体 DNA 聚合酶进行双脱氧测序反应实验

        材料 缓充液和溶液 去离子蒸馏水(冰预冷) 二硫苏糖醇(DTT)(100 mmol/L) dNTP 和 ddNTP,dNTP(0.5 mmol/L) 和 ddNTP(0.5 mmol/L) 储液 5X 标记混合液和 ddNTP 延伸/终止混合液(ddCTP、ddTTP、ddATP、ddGTP) 这些反应混合液可按表 12-5 给出的溶液体积混合配制。 甲酰胺上样缓冲液 测序酶稀释缓冲液

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