双脱氧链终止法测序用变性模板的制备实验

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

下面通过碱变性质粒 DNA 的方法应与方案 3 联合使用，因在此过程中采用测序酶催化双脱氧测序反应。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

双脱氧链终止法测序用变性模板的制备实验

材料缓冲液和溶液试剂、缓冲液、储液的组成参见附录 1, 储液使用前稀释到适当浓度。乙酸铵（5mol/L, 非缓冲，pH~7.4) 氯仿：异戊醇（24:1,V/V) DMSO 可选用，请参见步骤 10。乙醇 NaOH(2mol/L)/EDTA(2 mmol/L) 使用前将 10mol/L 氢氧化钠储液稀释到合适浓度。酚，用水或 TE(pH7.6) 平衡。测序反应缓冲液