噬菌体文库的铺平板和转移实验

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

文库一旦包装就应该尽快进行扩增，它可以大大增加文库的拷贝数，但在扩增时由于克隆的生长速率不同，文库的组成可能会出现某种潜在的改变。这种文库克隆组成比率的变化可以通过把文库克隆预吸附到细菌上并使用一种高密度铺平板和短期培养的方法而尽量减少。

来源：丁香实验

操作方法

基本方案

1. 通过系列等比稀释滴定噬菌体文库的滴度。 2. 重组噬菌体与铺平板的宿主菌混合于培养试管中（表一），于37 ℃温育20 min。表一、噬菌体文库铺平板组分最佳配制方法 3. 按每个平板的噬菌体数决定筛选文库时将用到的平板数。 4. 该数目取决于文库中重组噬菌体的数目和目的克隆出现的概率。 5. 在试管中加入0.7%顶层琼脂糖，并迅速倾倒在37