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) ,Neo(G418),Zeo,Hygro,其中Puro和BSR是较常用的真核抗性。真核抗性常用于稳定株筛选等过程,具体使用抗性筛选的浓度可通过空细胞抗性预实验确认,浓度梯度可根据抗生素说明书推荐浓度范围设置。(4)蛋白标签:蛋白标签(protein tag):与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。常见标签:3xFLAG,6xHis,HA,Myc ,OLLAS,GST等。需注意目的蛋白是否有功能肽如信号肽,前肽等,蛋白标签需要融合无功能肽的一端
性维持 → 确定工作浓度 快速版: 载体带 Puro 抗性 → puromycin,多数细胞 1~10 μg/ml 载体带 Neo 抗性 → G418,浓度范围更大,筛选周期更长 载体带 Bsd 抗性 → blasticidin,起效快、用量低 双载体系统(如 Cas9 + sgRNA)→ 两种抗生素同时维持,各取筛选浓度的 1/2~1/4 或更低 --- 一、三种常用抗生素对比 Puromycin(嘌呤霉素) Neomycin/G418 Blasticidin(杀
sunyuzhu10 包装质粒是pMD2.G pMDLg/pRRE pRSV-Rev 过表达载体是pLVX-IRES-ZsGreen1 这样的四个质粒能包装出慢病毒么? 请有经验的战友帮忙看下 暴君 可以的 644414915 pMD2.G是VSVG吗 我现在正在包病毒,别人给了我这四个质粒,别的什么都没说,我不知道该怎么包装装染 谁有具体步骤 转染
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