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- 2025年07月15日
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2ug
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naj2007 请教一下各位老师，在构建过表达载体的时候，VEGF和GFP是不是不可以做成融合蛋白，但是如果用不同的启动子的话，很容易丢失荧光，有没有什么解决方法。 zhujoker 可以做成融合蛋白的，即使是使用不同的启动子的话荧光也不那么容易丢失的，大不了你将荧光的启动子换成强的如CMV，EF1a之类。 kinguangjun 或者你可以用CMV-VEGF-IRES-GFP来做
1.常用载体分类：2,常用载体元件介绍：(1) 启动子：启动子是位于结构基因5'端上游的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性。启动子主要分为广谱启动子和特异性启动子。广谱启动子为在各种组织、细胞上广泛表达的启动子；特异性启动子为在特异性组织或者细胞类型上表达的启动子。常用广谱启动子有CAG，CMV，EF1a，PGK等，还包含启动RNA的III型启动子U6和H1启动子；常用特异性启动子如成熟神经元特异性启动子hSyn，投射神经元特异性启动
Sun’s lab. Science 2017[1]注射部位：小鼠脊髓载体：AAV-EF1a-DIO-ChR2(H134R)-mCherry& AAV-hSyn-eNpHR3.0-EYFP血清型：rAAV2/9病毒滴度：5.1× 1012 VG/mL&1.7× 1013 VG/mL注射体积：400-600nl Zhong Chen’s lab. Nat Commun, 2020[2]注射部位：PV-Cre小鼠的SNr区载体：PV-Cre: AAV-EF1a-DIO-ChR2(H134R
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