PCR耗材qPCR耗材GUNSTER(台湾钢士特)

99% 的人不知道的 PCR 耗材小机密！

和鉴别，特别是在高通量实验中。尽管塑料的颜色对 DNA 扩增没有影响，但在设置实时荧光定量 PCR 的反应时，与透明耗材相比，我们更推荐使用白色塑料耗材或者经磨砂处理的塑料耗材，以实现灵敏和准确的荧光检测。 qPCR 使用透明和白色耗材的结果比较（A）与透明孔相比，白色孔 Ct 值更低（灵敏度更高）。（B）白色孔在技术重复中也表现出更高的一致性。 白色耗材通过阻止荧光折射出管来提高 qPCR 数据的灵敏度和一致性。折射被最小化时，更多的信号被反射回检测器，从而增加信噪比。此外，白色管壁可阻止荧

PCR反应仪器、耗材的重要性

(10kb内） Tm值=4(G+C) +2(A+T) 循环次数 ：一般为25 ～ 30次。循环数决定PCR扩增的产量。模板初始浓度低，可增加循环数以便达到有效的 扩增量。但循环数并不是可以无限增加的。一般循环数为30个左右，循环数超过30个以后，DNA聚合酶活性逐渐达到饱和，产物的量不再随循环数的增加而增 加，出现了所谓的“平台期”。 PCR反应中耗材和仪器的重要性： 因PCR反应的精密度，使得在此过程中，耗材和仪器的辅助作用非常重要，如Tip的准度和残留度；PCR tube的密封

荧光定量 PCR 异常扩增曲线分析攻略

背景荧光信号有所波动，从而造成反应孔的自动基线扣除错误。 图二：基线自动扣除错误，导致扩增曲线抬升 2、确定耗材及仪器配件是否使用正确 耗材对于荧光定量 PCR 来说比较重要，很多异常的扩增曲线是由于耗材使用不当引起的。常见的耗材相关问题包括： 1）错误使用成普通 PCR 仪器所对应的耗材 普通 PCR 耗材一般透光度比较差，会造成荧光扩增曲线异常，比如打折的扩增曲线（图三）； 图三：错误使用普通 PCR 耗材的结果 2）未选择跟仪器加热模块规格匹配的耗材 目前 Applied