- ￥530
- Xkbio
- XK-SJH-A532
- 国产
- 2025年07月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
Glucoamylase test kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/24样
糖化酶(Glucoamylase)试剂盒说明书
分光光度法 50 管/24 样注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义糖化酶，即葡萄糖淀粉酶（EC3.2.1.3），又称 γ-淀粉酶，是一种外切型糖苷酶，它从淀粉的非还原性末端水解 α-1,4 糖苷键和 α-1,6 糖苷键，将淀粉完全水解为葡萄糖，因此广泛的应用于酒精、白酒、抗生素、氨基酸、有机酸，甘油，淀粉糖等工业中，是我国重要的工业酶制剂之一。
测定原理
糖化酶水解可溶性淀粉生成葡萄糖，与 3,5-二硝基水杨酸生成红棕色化合物，在 540nm 处有最大光吸收，在一定范围内反应液颜色深浅与葡萄糖的量成正比，可测定计算得糖化酶的活力。自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。试剂组成和配制
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：液体 25mL×1 瓶，4℃保存。（若出现沉淀，可以 90℃加热 5 分钟溶解后使用） 试剂二：液体 25mL×1 瓶，4℃避光保存。
酶液提取
1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于 4℃，10000g 离心 10min，取上清置于冰上待测。2. 细胞：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，
总时间 3min）；然后 4℃，10000g 离心 10min，取上清置于冰上待测。
3. 培养液或其它液体：直接检测。
测定操作
| 对照管 | 测定管 | |
| 样本（μL） | 50 | |
| 灭活样本（μL） | 50 | |
| 试剂一（μL） | 500 | 500 |
| 充分混匀，40℃反应 20min | ||
| 试剂二（μL） | 450 | 450 |
| 混匀，沸水浴 5min，自来水冷却后，于 1mL 玻璃比色皿，蒸馏水调零，测定 540nm 处吸光值A，△A=A 测定管-A 对照管 相关图片：   |
||
标准曲线：y = 0.2164x - 0.0182，R2 = 0.9992
- 按照蛋白含量计算
糖化酶活性（U/mg prot）=（△A+0.0182）÷ 0.2164×V 反总÷（V 样×Cpr）÷T
= 2.54×（△A+0.0182）÷ Cpr
- 按照样本质量计算
糖化酶活性（U/g 鲜重）=（△A+0.0182）÷ 0.2164×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）÷T
= 2.54×（△A+0.0182）÷ W
- 按照液体体积计算
糖化酶活性（U/mL）=（△A+0.0182）÷ 0.2164×V 反总÷V 样÷T
= 2.54×（△A+0.0182）
- 按照细胞数量计算
糖化酶活性（U/104cell）=（△A+0.0182）÷ 0.2164×V 反总÷（V 样×细胞数量（万个）÷V
样总）÷T
= 2.54×（△A+0.0182）÷ 细胞数量（万个）
V 反总：反应总体积，0.55mL，V 样：反应体系中加入样本体积，0.05mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T：反应时间，30min 注意事项
- 灭活样本的制备建议将样本放在沸水浴中煮沸 10min，以将酶彻底灭活。
- 测定之前进行预实验，若吸光值较高，请将样品用提取液进行适当的稀释再测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。
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文献和实验启动因子并孵育一段时间后开始，持续1-3min，一般应用于酶类项目，可以使用因数法来计算待测浓度。 生化检测原理示意图 过渡区对应是固定时间法，是终点法中存在一种特殊情况，指在时间-吸光度曲线上选择两个读数点，此两点既非反应初始吸光度亦非平衡点吸光度，这两点的吸光度差值用于结果计算。目的是解决某些化学反应的非特异性问题，提高准确度。 平衡区对应的是终点法，按测光点的个数分为：一点终点法、两点终点法。 一点终点法是指在反应到达平衡点，即在时间-吸光度曲线上吸光度不再改变时，选择一个测光点计算待测
生化检测，又称临床化学，是在研究人体健康和疾病的生物化学过程变化的基础上，利用化学、生物学、病理学、免疫学、生物化学的理论与技术，通过检测人体血液、尿液、脑脊液等样本中化学物质的量与质的变化，为临床医生或研究者提供疾病诊断、病情监测等信息。 生化检测试剂盒，则为生化检测提供了便捷——将测定特定指标所需要的试剂制成可直接使用或简单配制即可使用的固体或液体，为广大科研工作者省去查询文献资料、采购各种化学试剂、摸索试验条件、优化实验体系等所需要的时间和精力，同时，也大大节约了样本量，获得更可靠
水糖是利用麦芽中的糖化酶同大米中的淀粉发生化学反应，把淀粉转化为糖而制成的。 原料配方 (制22.5千克) 小麦1千克 大米2.5千克 水40千克 制作方法 1.将小麦发芽，即把小麦在清水中浸泡24小时左右，捞起放在萝筐内，早晚浇水催芽。 2.一般将大米浸泡后即可直接放在蒸笼里蒸煮。大米饭要蒸得松软，但不能过烂。 3.当芽长达5厘米时，即可把麦芽切碎拌入熟大米饭中，装进大缸里，再加水拌匀，盖上缸盖，缸内保持38℃左右的温度
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