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文献和实验0分钟。 2) 离心洗涤:向培养瓶内加5~10m1预冷的MEM使细胞悬浮,再将其吸出置灭菌离心管中,以1000rpm 离心8~10分钟后弃去上清液。 3) 细胞悬液的制备:向离心管内逐滴缓慢加入预冷的冻存保护液,使细胞浓度为150~400万/ml,然后迅速分装于安瓿瓶中,每瓶加量为lml。 4) 致冷冻结:将安瓿瓶放入带有棉垫的纸盒或塑料盒内,直立置不同条件下致冷冻结果保存: a. 4℃两小时后移至-20℃作用2小时,再移入-40℃4小时后在-70℃下24小时投入液氮。 b. -20
血清。5.配制成软骨细胞诱导培养液DMEM 10g/L,地塞米松10 nmol/L,L-α-磷酸维生素C 50 umol/L,L谷氨酰胺300mg/L,TGF-βl 10ng/ml,IGFl00ug/ml,10%胎牛血清。6.配制成脂肪细胞诱导液DMEM 10g/L,10%FBS,1-甲基-3-异丁基黄嘌呤0.5mmol/m1,地塞米松1mmol/m1,胰岛素10ug/m1,吲哚美辛100mmol/m1。 (二)骨髓基质干细胞的分离与培养1.人骨髓的抽取成年志愿者应无系统性疾病,年龄最好在20~40岁
carrier RNA/DNA的条件下避免硅胶材料不可逆吸附核酸造成的损失,cfDNA回收率约50%,高于文献THP(Triton/Heat/Phenol protocol)的回收率(38.7%)[2]。≥0.5 ml样品最终20 μl洗脱,5 μl电泳即可观察到核小体单位的143 bp片段,可作为估算cfDNA含量的依据。解决长时间冻存的血浆样品中血纤维影响产量和纯度的问题血浆长时间冻存或者反复冻融后产生血纤维,大量血纤维会影响cfDNA产量和纯度。cfDNA以某种方式附着或者结合于血纤维,因此不能简单
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