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- 国产
- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Ascorbate Peroxidase (APX) Test Kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/48样
分光光度法 50 管/48 样
测定意义：
APX 是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一，也是抗坏血酸代谢的关键酶之一。APX 具有多种同功酶，分别定位于叶绿体、胞质、线粒体、过氧化物和乙醛酸体，以及过氧化体和类 囊体膜上。APX 催化 H2O2 氧化 AsA，是植物 AsA 的主要消耗者。APX 的活性直接影响到AsA 的含量，APX 与 AsA 具有一定的负相关性。测定原理：
APX 催化催化 H2O2 氧化 AsA，通过测定 AsA 氧化速率，来计算得 APX 活性。自备仪器用品：低温离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿、移液枪、研钵、冰和蒸馏水。试剂组成和配制：
试剂一：液体 90mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加 5 mL 蒸馏水充分溶解。试剂三：液体 5mL×1 支，4℃保存。
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粗酶液提取：
按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL试剂一）进行冰浴匀浆。13000g，4℃离心 20min，取上清置冰上待测。测定：
- 分光光度计预热 30 min，调节波长到 290nm，用蒸馏水调零。
- 试剂一在 25℃中预热 30min。
- 依次在 1mL 石英比色皿中加入 100μL 上清液、700μL 预热的试剂一、100μL 试剂二和100μL 试剂三，迅速混匀后在 290nm 测定 10 s 和 130 s 光吸收 A1 和 A2，△A=A1-A2。APX 活性计算公式：
活性单位定义：每毫克蛋白每分钟氧化 1μmol AsA 为 1 个酶活单位。
APX(μmol/min/mg prot) = △A÷(ε×d）×V 反总×106÷(Cpr×V 样)÷T
=1.79×△A÷ Cpr
（2）按样本质量计算
活性单位定义：每 g 组织每分钟氧化 1μmol AsA 为 1 个酶活单位。
APX(μmol/min/g 鲜重 ) = △A÷(ε×d）×V 反总×106÷(W×V 样÷V 样总)÷T
=1.79×△A ÷W
ε：AsA 在 290nm 处摩尔吸光系数为 2.8×103 L/mol/cm；d：比色皿光径（cm），1 cm；V 反总：反应体系总体积（L），1000μL=1×10-3 L；106：1mol=1×106μmol；V 样：加入反应体系中上清液体积（mL），100μL=0.1 mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：上清液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定，建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒；W：样本质量，g；T：催化反应时间（min），2min。
注意事项：
配制好的试剂二 4℃保存，并且 3 天内使用完。
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文献和实验一、目的1、了解聚丙烯酰胺凝胶电泳原理2、了解聚丙烯酰胺凝胶的制作过程3、了解过氧化物酶同工酶电泳过程二、实验原理：1、电泳原理及影响电泳的主要因素带电粒子在电场中向与其自身带相反电荷的电极移动，这种现象称为电泳。用电泳技术分离、分析蛋白质、酶、核酸等生物大分子，有较高的分辨率，目前已成为生物科学研究中必不可少的手段之一。带电离子在电场中的泳动速度（1）和迁移率（泳动度）（2）V= E·q·a/6πrη
水解，生成新的甘油，达到新的平衡，因此样品与R1试剂孵育时间越长，测得甘油三酯值就越低。甘油三酯测定，不仅要去除游离甘油，而且还要克服样本含量真实性发生的变化，试剂中必须加入甘油激酶，并且延迟时间要标准化。所以，一些试验项目在消除内源性物质干扰的同时，会带来样品含量真实性的变化。 参考文献 [1]韩志钧，黄志锋，卢业成，主编．临床化学常用项目自动分析法[M]．沈阳：辽宁科学技术出版社，2005．29—112． [2]张万忠．临床生化试剂盒质量评估方法[J]．上海
2011年检验技师考试辅导对血、尿、便常规检验影响因素的综述
出现异常的患者应重新采血复查。 2、尿常规 现在绝大数医院都是采用干化学法进行尿中葡萄糖（GLU）、胆红素（BIL）、酮体（KET）、比重（SG）、潜血（BLD）、酸碱度（PH）、蛋白质（PRO）、尿胆原（URO）、亚硝酸盐（NIT）、白细胞（LEU）、抗坏血酸（Vc）的测定。 2.1葡萄糖 干化学法的特异性强，试剂块只与葡萄糖反应。而班氏法则与尿中所有还原性糖（葡萄糖、乳糖和半乳糖）和所有还原性物质都反应。在稀释的尿液中，当比重偏高时，葡萄糖测试的反应灵敏度降低。当Vc
