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- 国产
- 2026年03月03日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Soil N-acetyl-β-D-glucosidase (S-NAG) test kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100T
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG)测定试剂盒说明书
荧光法 100 管/96 样
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。测定意义：
土壤 N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）是溶酶体中的一种酸性水解酶，由土壤微生物分泌。在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能，S-NAG 活性变化与机体某些病理状态密切相关。测定原理：
4-羟甲基-7-香豆素(MUB)在 365 nm 波长处激发, 能在 470 nm 处检测到荧光, 它与某些物质结合后荧光特性消失, 通过酶的水解作用MUB 释放出来, 通过检测荧光量来表征酶活性。自备仪器和用品：
多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水。试剂组成和配制：
试剂一：液体 120mL×1 瓶，4℃保存。试剂二：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。用前加 11 mL 蒸馏水充分溶解（可 50℃震荡溶解）。试剂三：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。
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粗酶液提取：
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30~50 目筛。按照土壤质量（g）：试剂一 mL)为 1： 5~10 的比例（建议称取约 0.1g 土壤，加入 1mL 试剂一），振荡混匀。测定步骤：
- 测定管：在震荡条件下取 100 μL 土壤悬液到 EP 管中，加入 100 μL 试剂二，30℃震荡避光培养 3 h，从中吸取 134 μL 到黑色不透光 96 孔板中，加入 66 μL 试剂三后用多功能酶标仪进行检测，激发光波长 365 nm，测定波长 470nm。
- 对照管：取 100 μL 蒸馏水到 EP 管中，加入 100 μL 试剂二，30℃震荡避光培养 3 h， 从中吸取 134 μL 到黑色不透光 96 孔板中，加入 66 μL 试剂三后用多功能酶标仪进行检测，激发光波长 365 nm，测定波长 470nm。 ΔA=A 测定-A 对照
注意：对照管只需测定一次。
S-NAG 活性计算公式：
标准曲线：y = 62629x - 2266.4 R2 = 0.9996 x：MUB 标准品浓度（nmol/mL）
y：荧光强度酶活（nmol/h /g 土样）=(ΔA+2266.4)÷62629×V÷T÷W
=(ΔA+2266.4)÷187887÷W
V：提取液体积，1 mL；W：土壤样品质量，g；T：催化反应时间，3 h
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文献和实验- 氨基葡萄糖苷酶（ NAG ） 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 N- 乙酰 - β -D- 氨基葡萄糖苷酶（ NAG ） 抗原，再与 HRP 标记的 N- 乙酰 - β -D- 氨基葡萄糖苷酶（ NAG ） 抗体结合，形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 N- 乙酰 - β -D- 氨基葡萄糖苷酶（ NAG ） 呈正相关。用酶标
近年来许多文献报道，尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)是诊断肾脏早期损害的灵敏指标。为探讨糠尿病、高血压、腔隙性脑梗塞、冠心病与早期肾脏损伤的关系，我们对377例患有以上疾病的老年人进行了尿NAG的检测。测定结果表明，糖尿病、高血压、腔隙性脑梗塞、冠心病可导致早期肾脏损害或与早期肾脏损害有联系。现将结果报告如下。 1 资料与方法 1.1 研究对象 本组共检测60岁以上患者377例，系本院住院病人均经相关项目检查和临床诊断。男176例，女201例
组成 肾早期损伤检测 1. 尿微量白蛋白（mAlb） 2 .尿β2-微球蛋白 （β2-m） 3 .尿N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG） 4 .尿肌酐（Cr） 标本及要求 标本类型：晨尿、随意尿或24h尿，最好用晨尿。 检测时间：周一至周六上午。 开单要求：在申请单“检测目的”栏上填写“肾早期损伤”即可。
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