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细胞色素b5含量生化检测试剂盒

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  • XK-SJH-A566
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  • 2025年07月12日
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    • 英文名

      Cytochrome b5 content test kit

    • CAS号

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      上海晅科生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      50管/48样

    产品细节图片1
    㓶胞色素 b5(Cytochrome b5)含䟿测定试剂盒说明书
    光光度法    50 管/48 ṧ
    注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差ᔲ大的ṧ本做预测定˚
    测定意义:
    胞色素P450  酶是一组▲要存在于肝脏的同工酶,在外源物质代谢中ާ有重要作用,尤ަ是药物和毒物的代谢˚㓶胞色素P450 和㓶胞色素 b5 是P450 酶系的两个血红素蛋白,ަ比值的变化与P450 代谢活性密࠷相关˚
    测定原理:
    氧化型㓶胞色素 b5 㓿连二 硫酸钠还原后,在 424nm 处有最大吸收峰,通过测定 424nm 和490nm 处吸光值的差ᔲ,即可䇑算出㓶胞色素 b5 的含䟿˚
    自备仪器和用品:
    可见光光度䇑ǃ普通离心机,超速离心机ǃ可调式移液枪ǃ1mL 玻璃比色皿和蒸馏水˚试剂组成和配制:
    试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存˚临用前加 100mL 蒸馏水,充溶解˚ 试剂二:液体×1 瓶,4℃保存˚
    试剂й:粉剂×1 瓶,4℃保存:
    工作液配制:临用前配制,戴一次性手套,小心打开试剂й瓶盖,加试剂二 50 mL 充࠶溶解,4℃避光可保存 1 周˚
    ṧ品中㓶胞色素 b5 提取:
    1ǃ除去㓶胞Ṩ,线粒体等大࠶子物质:ƒ约 0.5g 组㓷,加入 1mL 试剂一,冰k充研磨,
    10 000g 4℃离心 30min,取k清液,转入超速离心管中˚
    2ǃ粗制微粒体:100 000g,4℃离心 60min,ᔳk清液˚
    3ǃ除血红蛋白等杂质:向步骤 2 的沉淀中加 1mL 试剂一,盖紧后充࠶震荡溶解,100 000g
    离心 30min,ᔳk清液˚
    4ǃᖵ测液:向步骤 3 的沉淀中加试剂二 0.5mL,盖紧后充࠶震荡溶解,即ᖵ测液,该ᖵ 测液需当天测定˚
    㓶胞色素 b5 含䟿测定操作:
    1. 光光度䇑预热 30 min˚
    2. 工作液置于 25℃水浴中预热 30 min˚
    3. 空白管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 50 µ L 蒸馏水,1000µ L 工作液,室温静置 2 min, 424nm 和 490nm 处吸光值,424nm 处吸光值记Ѫ A 空白管 1,490nm 处吸光值记Ѫ A 空白管 2˚△A 空白管= A 空白管 1- A 空白管 2
    4. 测定管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 50 µ L ᖵ测液,1000µ L 工作液,室温静置 2 min, 424nm 和 490nm 处吸光值,424nm 处吸光值记Ѫ A 测定管 1,490nm 处吸光值记Ѫ A 测定管 2˚△A 测定管= A 测定管 1- A 测定管 2˚
    注意:只需要做一个空白管˚

    相关图片:
    产品细节图片2产品细节图片3
    ṧ品㓶胞色素 b5 含䟿䇑算公式:
    1. 按照蛋白浓度䇑算:
    㓶胞色素 b5 含䟿(nmol/mg prot)= (△A 测定管-△A 空白管)÷ε÷d×V 反总÷(Cpr×V ṧ)
    = 0.123×(△A 测定管-△A 空白管)÷Cpr
    1. 按照ṧ本质䟿䇑算:
    㓶胞色素 b5 含䟿(nmol/g  鲜重)= (△A 测定管-△A 空白管)÷ε÷d×V 反总×(V ṧ总÷V ṧ)
     
    ÷W
    = 0.0614×(△A 测定管-△A 空白管)÷W
    ε:还原型㓶胞色素 b5 纳摩尔消光系数,171×10-3 L/nmol/cm:d:比色皿光ᖴ(cm),1cm: V 反总:反应体系总体〟,1.05 m L=0.00105 L:Cpr:ᖵ测液蛋白质浓度(mg/mL),需要另外测定:V ṧ:加入反应体系中ᖵ测液体〟,50 µ L=0.05 mL:V ṧ总:ᖵ测液总体〟,
    0.5 mL:W:ṧ品质䟿,g˚
    产品细节图片4

     

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