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- 2025年07月11日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
三个月
- 英文名：
Plasmid vector
- 库存：
10
- 供应商：
上海雅吉
- 规格：
质粒干粉
产品规格：质粒干粉
如需该质粒图谱质粒序列质粒属性等信息可以联系客服索取。www.yajimall.com
亲爱的科研工作者，感谢您信任雅吉生物，我们致力于为大家分享质优价适的质粒，受各种因素影响，我们只保证质粒的关键序列测序正确，不能保证实验效果。请您收到质粒后请务必先转化，再挑取单菌落扩增，不要直接使用。如果您需要即用的大包装质粒或病毒颗粒，可委托我们制备，性价比更高。
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科学领域，科研机构、高校、院所及企业产品开发研究提供所需要的科研类试剂、耗材、仪器、技术服务等。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学，通过公司各个部门所有员工的共同努力在行业内拥有较高知名度，深得新老客户的厚爱，本着“优质、服务、信誉”的精神，坚持以先进的技术、优质的产品、良好的信誉，为国内外广大用户提供优质生物产品和服务。公司在重视产品质量的同时，也建立了一套集技术支持、物流、售后服务等多个部门的全方位的服务体系，努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户本研究所郑重承诺：质量保证、供货及时、服务周到，公司总投资超过2000万元，并先后引进了自动化设备，组建了专业的研发技术团队。凭借着洁净化的生产车间、标准化的质量管理系统，为生产高质量的产品提供了有效保证。雅吉生物自主研发的ELISA试剂盒，在国内众多重点实验室广泛使用，深受广大科研人员的好评，先后在权威杂志文章中被引用。
pLVX-IRES-Puro质粒，产品图例：
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片：
更多产品可查询官网或咨询客服：pLVX-IRES-Puro质粒
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文献和实验sunyuzhu10 包装质粒是pMD2.G pMDLg/pRRE pRSV-Rev 过表达载体是pLVX-IRES-ZsGreen1 这样的四个质粒能包装出慢病毒么？ 请有经验的战友帮忙看下 暴君 可以的 644414915 pMD2.G是VSVG吗 我现在正在包病毒，别人给了我这四个质粒，别的什么都没说，我不知道该怎么包装装染 谁有具体步骤 转染质粒
型质粒 （3）必需具备一个以上的酶切位点，有选择的余地； （4）必需有易检测的标记，多是抗生素的抗性基因，不特指多位 Ampr（试一试）。 （5）满足自己的实验需求，是否需要包装病毒，是否需要加入荧光标记，是否需要加入标签蛋白，是否需要真核抗性（如Puro、G418）等等。 无论选用哪种载体，首先都要获得载体分子，然后采用适当的限制酶将载体 DNA 进行切割，获得线性载体分子，以便于与目的基因片段进行连接。 如何阅读质粒图谱 第一步：首先看 Ori 的位置，了解质粒的类型（原核/真核
表达都要根据载体的说明选择相应抗生素，不是可以随便用的。做细胞表达时，如果只是要求短时表达（即所谓瞬时转染），可不必用细胞抗生素。丁香园网友mikke_2000认为：应该是质粒转染细胞，筛选出稳定表达新基因的细胞系吧。筛选所选用的抗生素是跟你转染所用的质粒上所带的真核筛选抗性基因有关的。最常见的载体上带有新霉素抗性基因neo，所以筛选的时候用G418，如果带有嘌呤霉素的抗性基因就要选用puro。另外如果双转染，要考虑到两种质粒的筛选抗性的兼容。G418等的筛选浓度最好也用预试验摸一下~~
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