- ￥560
- Xkbio
- XK-SJH-A550
- 国产
- 2025年07月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Exo-β-1,4-glucanase (C1)/cellobiohydrolase test kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/24样
外切-β-1，4-葡聚糖酶（C1）/纤维二糖水解酶活性测定试剂盒说明书
分光光度法 50 管/24 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：
C1（EC3.2.1.91）存在于细菌、真菌和动物体内，是纤维素酶系的组份之一，C1催化多聚糖链的末端非还原端释放出纤维二糖和葡萄糖。测定原理：
采用3,5－二硝基水杨酸法测定C1催化微晶纤维素降解产生的还原糖的含量。需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。试剂的组成和配制：
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存；试剂一：液体 15mL×1 瓶，4℃保存； 试剂二：液体 60mL×1 瓶，4℃保存；
样品测定的准备：
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
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测定步骤：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 540nm，蒸馏水调零。2、加样表（在EP 管中依次加入下列试剂）：
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管 |
| 样本 | 50 | 50 |
| 试剂一 | 500 | |
| 蒸馏水 | 500 |
| 试剂二 | 1000 | 1000 |
C1 活性计算
1、标准条件下测定回归方程为 y = 6.4078x - 0.0673；x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。
2、血清（浆）C1 活力的计算
单位的定义：每 mL 血清（浆）每分钟催化产生 1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
=14.305×(ΔA+0.0673)
3、细胞、细菌和组织中 C1 活力的计算
- 按照蛋白浓度计算
C1 活力(μg /min/mg prot)=[ [1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V 反总]÷(V 样×Cpr) ÷T
=14.305×(ΔA+0.0673) ÷Cpr
- 按样本鲜重计算
C1 活力(μg /min /g 鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V 反总]÷(W× V 样÷V 样总) ÷T
=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W
- 按细菌或细胞密度计算
C1 活力(μg /min /104 cell)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V 反总]÷(500×V 样÷V 样总) ÷T
=0.0286×(ΔA+0.0673)
1000：1mg/mL=1000ug/mL；V 反总：反应体系总体积，0.55mL； V 样：加入样本体积，
0.05 mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，120 min；Cpr：样本蛋白质浓度， mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500 万。
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文献和实验纤维素是地球上最丰富的可再生有机资源，其生物降解完全是微生物--细菌和真菌完成的。1、真菌：分泌胞外游离的纤维素酶，以水解酶机制和氧化酶机制降解纤维素。2、细菌纤维素酶则是以形成多酶复合体结构而起作用，能更加彻底有效地降解天然纤维素。纤维素完全降解需要三类酶的协同作用：内切葡聚糖酶、外切葡聚糖纤维二糖水解酶、B-葡萄糖苷酶。目前、纤维素酶的研究热点有：1、以纤维素为添加剂 生产可完全降解的塑料。存在的问题是高产完整活性的工程菌的获得存在困难，对纤维素酶基因克隆酵母分泌表达系统是目前研究的热点
。水解后产生等量的D-葡萄糖和D-果糖，这个混合物称为转化糖，甜度为160。蜜蜂体内有转化酶，因此蜂蜜中含有大量转化糖。因为果糖的比旋比葡萄糖的绝对值大，所以转化糖溶液是左旋的。在植物中有一种转化酶催化这个反应。口腔细菌利用蔗糖合成的右旋葡聚糖苷是牙垢的主要成分。 （四）纤维二糖 是纤维素的基本构成单位。可由纤维素水解得到。由两个β-D-葡萄糖通过C1－C4相连，它与麦芽糖的区别是后者为α-葡萄糖苷。 （五）海藻糖 α-D-吡喃葡萄糖-(1→1)- α-D-吡喃
中性肽链内切酶，水解脑啡肽、趋化肽和P物质 CD11a MHM24,2F12;CRIS-3 Leu LFA-1(gp180/95)的α链 与ICAM-1（CD54）和ICAM-2（CD102）结合 CD11b Mol,OKM1; (Mac-1,CR
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