OmL-02慢病毒纯化试剂盒（ 磁珠型 ）

OmL-02慢病毒纯化试剂盒（ 磁珠型 ）

产品 简介 
本产品是一款以磁珠为分离介质的慢病毒纯化试剂。在特定的缓冲体系中，磁珠可吸附慢病毒，
并被特定的洗脱液（或 PBS 与 ddH 2 O）洗脱下来。慢病毒纯化后，滴度提高 10 倍以上，且利用 PBS
或 ddH 2 O 洗脱后的慢病毒不含其它化合物，可直接用于动物体内注射。

特点与优势
1. 本试剂纯化效率高，磁珠吸附慢病毒的效率达到 95%以上。
2. 纯化后的慢病毒滴度提高 10 倍以上。
3. 本试剂盒纯化的慢病毒不含其它化合物，可以直接用于动物实验。
4. 本试剂盒操作简单，能够在 2 h 内完成慢病毒的纯化实验。

使用说明
1. 慢病毒包装。慢病毒包装实验请参考本公司产品（ 慢病毒包装试剂盒 ，Cat ：OmL-01）说明书
中的实验步骤。
2. 含慢病毒的细胞培养上清收集。293T 细胞（直径为 100 mm 培养皿培养）转染慢病毒包装质粒
及骨架质粒后 48 h，收集第一批细胞培养上清（10 ml），并加入 10 ml 新鲜细胞培养液，继续
培养 24-48 h，收集第二批细胞培养上清 （ 第二批收集的 细胞培养上清中慢病毒 滴度高于第一
批） ）。所有含有慢病毒的细胞培养上清保存在 4℃冰箱中。

3. 慢病毒纯化。本产品提供的慢病毒纯化体系是 20 ml，各组份如下表。参照下表将各种试剂与含
有慢病毒的细胞培养上清加入 50 ml 无菌离心管中，置于旋转混合器中，4 ℃旋转混合 60 min。
试剂 名称  试剂体积（ml ）  含量
Buffer LP  6  30%
Buffer LS  2  10%
含慢病毒的细胞培养上清  11  55%
磁珠  1  5%
合计  20  100%
4. 磁珠收集。将离心管置于磁力架上，4 ℃静置 5-10 min，使磁珠聚集，弃上清（或 5 000 rpm，4 ℃
离心 5 min，沉淀磁珠，弃上清）
5. 残余液体去除。将装有磁珠沉淀的离心管转入离心机，5 000 rpm，4 ℃离心 1-2 min，用移液器
吸尽管中残余液体。
6. 洗脱。加入 1.2 ml Buffer LE（或 PBS 与 ddH 2 O），剧烈震荡（Vortex）1 min，8 000 rpm，4 ℃
离心 2 min， 立即将上清转移至新的无菌 EP 管中，即为纯化的慢病毒溶液。
7. 过滤。利用试剂盒提供的针式过滤器，过滤纯化的慢病毒溶液，除去杂质。
8. 纯化的慢病毒可立即用于滴度测定，或感染目的细胞，也可保存在 4 ℃（ 有效期 1  个月）。
9. 感染细胞时，纯化的慢病毒溶液与细胞培养液按照不同比例混合（ 一般情况下等比例混合），
加入细胞中，并添加 polybrene 或本公司的 慢 病毒感染增强试剂盒 （Cat ：OmL-04 ）中的病毒感
染增强试剂。
10. 慢病毒感染 24 h，换液，72 h 后观察 GFP 荧光强度或检测目的蛋白表达变化。

注意事项
1.  磁珠不可冻 存，否则失效。
2. 强烈建议使用本公司的 慢 病毒感染增强试剂盒 （Cat ：OmL-04 ）来提高慢病毒的感染效率。
3. 请使用试剂盒提供的针式过滤器过滤纯化的慢病毒溶液，不要使用常规的 0.2 μm 和 0.45 μm 孔
径滤膜的滤器过滤，以免降低慢病毒滴度。
4. 纯化的慢病毒保存条件：4 ℃， ， 一个月； ；-80 ℃， ， 长期保存 ，但冻存后慢病毒活性降低。
5. 含慢病毒的细胞培养上清不用离心和过滤，直接用于慢病毒纯化，效果较好。
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。