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蔗糖磷酸合成酶(SPS)生化试剂盒

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  • 2025年07月14日
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    • 英文名

      Sucrose Phosphate Synthase (SPS) Test Kit

    • CAS号

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      上海晅科生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      50管/24样

    产品细节图片1
    蔗糖磷酸合成酶(Sucrose phosphate synthase,SPS)试剂盒

    分光光度法 50 管/24 样

    正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义

    蔗糖不仅是重要的光合产物,也是植物体内运输的主要物质,还是碳水化合物的贮存形式之一。SPS(EC 2.4.1.14)以果糖-6-磷酸为受体,形成的蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系统看作是蔗糖合成的主要途径。

    测定原理

    蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸,蔗糖磷酸与间苯二酚反应可呈现颜色变化, 在 480nm 下有特征吸收峰,酶活力大小与颜色的深浅成正比。

    需自备的的仪器和用品

    可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

    试剂的组成和配制

    提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;
    试剂一:液体 4mL×1 瓶,-20℃保存;
    试剂二:1000μg/mL 蔗糖溶液 10mL×1 瓶,4℃保存; 试剂三:液体 3mL×1 瓶,4℃保存;
    试剂四:液体 40mL×1 瓶,4℃保存; 试剂五:液体 10mL×1 瓶,4℃保存; 样品测定的准备
    按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL
    提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

    测定步骤

    试剂名称(μL) 测定管 对照管 标准管 空白管
    样本 30 30    
    蒸馏水   150 150 180
    试剂二     30  
    试剂一 150      
    混匀,25℃准确水浴 10min
    试剂三 50 50 50 50
    沸水浴中煮沸 10min 左右(盖紧,以防止水分散失),冷却
    试剂四 700 700 700 700
    试剂五 200 200 200 200
    混匀,沸水浴 30min,冷却后, 480nm 下测定各管吸光值。标准管和空白管只要做一管。每个测定管需要设一个对照管。

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    产品细节图片2产品细节图片3

    SPS 活力单位的计算

    1、按照蛋白浓度计算
    单位定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
    SPS 活性(μg /min/mg prot)= C 标准管×V1×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr
    2、按照样本鲜重计算
     
    单位定义:每 g 组织每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
    SPS 活性(μg /min /g 鲜重) =   C 标准管×V1×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W
    C 标准管:标准管浓度,1000μg/mL;V1:加入反应体系中样本体积,0.03mL; V2:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g;T :反应时间:10min。

    产品细节图片4

     

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