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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
33
- 英文名:
Sucrose Phosphate Synthase (SPS) Test Kit
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100管/48样

蔗糖合成酶(合成方向;SS-Ⅱ)试剂盒
微量法 100 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义
蔗糖是源(叶片等)光合产物向“库”器官运输的主要形态。蔗糖合成酶(Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13)是双向反应酶,既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解,是蔗糖代谢的关键酶之一。研究其合成方向 SS-Ⅱ的活性对于植物蔗糖合成具有重要意义。测定原理
SS-Ⅱ催化游离果糖与葡萄糖供体 UDPG 反应生成蔗糖,蔗糖与间苯二酚反应可呈现颜色变化,在 480nm 下有特征吸收峰,酶活力大小与颜色的深浅成正比。需自备的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰试剂的组成和配制
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;试剂一:液体 2.5mL×1 瓶,-20℃保存;
试剂二:1000μg/mL 蔗糖溶液 10mL×1 瓶,4℃保存; 试剂三:液体 2mL×1 瓶,4℃保存
试剂四:液体 25mL×1 瓶,4℃保存; 试剂五:液体 6mL×1 瓶,4℃保存; 样品测定的准备:
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL
提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 480nm,蒸馏水调零。2、样本测定,(在 EP 管中依次加入下列试剂):
| 试剂名称(μL) | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
| 样本 | 10 | 10 | ||
| 蒸馏水 | 45 | 45 | 55 | |
| 试剂二 | 10 | |||
| 试剂一 | 45 |
| 试剂三 | 15 | 15 | 15 | 15 |
| 试剂四 | 210 | 210 | 210 | 210 |
| 试剂五 | 60 | 60 | 60 | 60 |
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1、按照蛋白浓度计算
单位定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SS-Ⅱ活性(μg /min/mg prot)= C 标准管×V1×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr
2、按照样本鲜重计算
单位定义:每 g 组织每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SS-Ⅱ活性(μg /min/g 鲜重) = C 标准管×V1×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W
C 标准管:标准管浓度,1000μg/mL;V1:加入反应体系中样本体积,0.01mL; V2:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g;T :反应时间:10min。
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文献和实验联有ATP的磷酸键断裂的酶类。例如,谷氨酰胺合成酶、氨基酸:tRNA连接酶等。 二、酶的命名 (一)习惯命名法 1.一般采用底物加反应类型而命名,如蛋白水解酶、乳酸脱氢酶、磷酸己糖异构酶等。 2.对水解酶类,只要底物名称即可,如蔗糖酶、胆硷酯酶、蛋白酶等。 3.有时在底物名称前冠以酶的来源,如血清谷氨酸-丙酮酸转氨酶、唾液淀粉酶等。 习惯命名法简单,应用历史长,但缺乏系统性,有时出现一酶数名或一名数酶的现象。 (二)系统命名法 鉴于新酶
联有ATP的磷酸键断裂的酶类。例如,谷氨酰胺合成酶、氨基酸:tRNA连接酶等。 二、酶的命名 (一)习惯命名法 1.一般采用底物加反应类型而命名,如蛋白水解酶、乳酸脱氢酶、磷酸己糖异构酶等。 2.对水解酶类,只要底物名称即可,如蔗糖酶、胆硷酯酶、蛋白酶等。 3.有时在底物名称前冠以酶的来源,如血清谷氨酸-丙酮酸转氨酶、唾液淀粉酶等。 习惯命名法简单,应用历史长,但缺乏系统性,有时出现一酶数名或一名数酶的现象。 (二)系统命名法 鉴于新酶
指生物体内由葡萄糖等单糖合成糖原的过程。为糖原分解的逆过程。将更普遍的用低分子的乳糖等通过糖酵解的逆过程而生成糖原的过程称糖异生以资与之区别。动物主要在肝脏或肌肉中进行,为能源储藏的一个主要过程。食物消化后由消化器官吸入血液中的葡萄糖,通过肝门脉而运到肝脏,在那里在已糖激酶和 ATP的作用下先磷酸化成 6-磷酸葡萄糖,再经 1-磷酸葡萄糖而成 UDP葡萄糖,再在糖原合成酶的作用下生成糖原。此时形成α- 1, 4-糖苷键,但其α- 1, 6键由称为脱支酶的一种转糖苷酶的协同
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