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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
Liver Lipase (HL) Test Kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/48样
肝酯酶（Hepatic lipase，HL）试剂盒
微量法 100T/48S
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。测定意义
肝酯酶是脂肪分解酶，在肝实质细胞中合成，存在于肝脏窦周间隙内皮细胞表面和窦周间隙腔面的肝细胞微绒毛表面，可促进脂蛋白中的胆固醇向类固醇激素转化，血浆中的 HL 活性增高时，血浆中小颗粒可导致 LDL 水平升高，加速动脉粥样硬化的发生。测定原理
肝酯酶水解 α-乙酸萘酯产生 α-萘酚，可与固蓝 B 盐形成紫红色偶氮化合物，在 595nm 有特征吸收峰，颜色深浅在一定范围内与肝酯酶活性成正相关。
自备实验用品及仪器
天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板。试剂组成和配制
试剂一：液体 110mL×1 瓶，4℃保存。试剂二：液体 1mL×1 瓶，4℃避光保存。试剂三：液体 8mL×1 瓶，4℃保存。
试剂四：液体 1mL×1 瓶，4℃避光保存。
样品处理
- 组织：按照质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL 试剂一）加入
- 细胞：按照细胞数量（104 个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL试剂一）加入试剂一，冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后于 4℃，10000g 离心 10min，取上清待测。
- 血清：直接测定。
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计算公式
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- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y= 0.1519 x -0.1241，R2=0.9994 1．按照蛋白浓度计算
HL 活性（μmol /min/mg prot）= （△ A+0.1241）÷0.1519×V 反总÷（V 样×Cpr）÷T
= 6.58×（△ A+0.1241）÷Cpr
- 按照样本质量计算
= 6.58×（△ A+0.1241）÷W
- 按照细胞数量计算
HL 活性（μmol /min/104 cell）= （△ A+0.1241）÷0.1519×V 反总÷（V 样×细胞数量÷V 样总）÷T
= 6.58×（△ A+0.1241）÷细胞数量4．按照液体体积计算
酶活性定义：每毫升血清每分钟水解 α-乙酸萘酯产生 1μmol α-萘酚为一个酶活力单位。HL 活性（μmol
/min/mL）=（△ A+0.1241）÷0.1519×V 反总÷V 样÷T
= 6.58×（△ A+0.1241）
V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；W：样本质量，g；V 样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，10min
-
- 用 96 孔板测定的计算公式如下
- 按照蛋白浓度计算
= 13.16×（△ A+0.1241）÷Cpr
- 按照样本质量计算
= 13.16×（△ A+0.1241）÷W
- 按照细胞数量计算
HL 活性（μmol /min/104 cell）= （△ A+0.1241）÷0.076×V 反总÷（V 样×细胞数量÷V 样总）÷T
= 13.16×（△ A+0.1241）÷细胞数量4．按照液体体积计算
酶活性定义：每毫升血清每分钟水解 α-乙酸萘酯产生 1μmol α-萘酚为一个酶活力单位。HL 活性（μmol
/min/mL）=（△ A+0.1241）÷0.076×V 反总÷V 样÷T
= 13.16×（△ A+0.1241）
V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；W：样本质量，g；V 样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，10min
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文献和实验相关实验
肝脂酶（hepaticlipase或hepatiltriglyceridase或hepaticendothelaillipase，HL或HTGL）属于与血液循环中内源性TG代谢有关的酶之一，与LPL在功能上有相似之处，然而却是两种不同性质的酶。其特点是：①HL活性不需要ApoCⅡ作为激活剂；②SDS可抑制HL活性，而不受高盐浓度及鱼精蛋白的抑制；③主要作用于小颗粒脂蛋白，如VLDL、残粒残余CM及HDL，同时又调节胆固醇从周围组织转运到肝，使肝内的VLDL转化为LDL
问：请教肝酯酶的生理功能及其测定方法？答：肝脂酶（hepaticlipase或hepatiltriglyceridase或hepaticendothelaillipase，HL或HTGL）属于与血液循环中内源性TG代谢有关的酶之一，与LPL在功能上有相似之处，然而却是两种不同性质的酶。其特点是：①HL活性不需要ApoCⅡ作为激活剂；②SDS可抑制HL活性，而不受高盐浓度及鱼精蛋白的抑制；③主要作用于小颗粒脂蛋白，如VLDL、残粒残余CM及HDL，同时又调节胆固醇从周围组织转运到肝，使肝内
技术资料肝脂酶（HL）测试盒
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