相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
33
- 英文名:
Alcohol dehydrogenase (ADH) test kit
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50管/48样

乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)活性测定试剂盒
分光光度法 50 管/48 样
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。测定意义:
ADH 是生物体内短链醇代谢的关键酶,催化乙醇与乙醛可逆转换,在很多生理过程中起着重要作用。哺乳动物 ADH 主要在肝脏生成,肝脏损伤导致 ADH 释放到血清中。血清 ADH 活性高低反映了肝功能是否异常。测定原理:
ADH 催化 NADH 还原乙醛生成乙醇和 NAD+,NADH 在 340nm 处有吸收峰,而 NAD+没有; 测定 340nm 吸光度下降速率,来计算 ADH 活性。自备仪器和用品:
研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿、可调式移液器和蒸馏水。试剂组成和配制:试剂一:液体×1 瓶,室温保存。
试剂二:液体×1 瓶,4℃保存。临用前把试剂三转移到试剂二中,4℃保存。试剂三:粉剂×1 瓶,-20℃保存。
试剂四:液体×1 支,4℃保存。粗酶液提取:
1、 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆。16000g,4℃离心 20min,取上清置冰上待测。
2、 细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):试剂一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7秒,总时间 3min);16000g, 4℃离心 20min,取上清液置冰上待测。
3、血清等液体:直接测定。
ADH 测定操作:
- 分光光度计预热 30 min,调节波长到 340 nm,蒸馏水调零。
- 试剂二在 25℃水浴中保温 30 min。
- 空白管:在 1mL 石英比色皿中依次加入 100μL 蒸馏水、800μL 试剂二和 100μL 试剂四, 迅速混匀后于 340nm 测定吸光值变化,分别记录 15s 和 75s 时吸光值,分别记为 A1 和A2。△A 空白管=A1-A2。。
- 测定管:在 1mL 石英比色皿中依次加入 100μL 上清液、800μL 试剂二和 100μL 试剂四, 迅速混匀后于 340nm 测定吸光值变化,分别记录 15s 和 75s 时吸光值,分别记为 A3 和A4。△A 测定管=A3-A4。

注意:空白管只需测定一次。计算公式:
- 按照蛋白浓度计算
ADH (μmol/min/mg prot) =[(△A 测定管–△A 空白管)÷ε÷d×V 反总×106] ÷(Cpr×V 样)÷T
=1.61×(△A 测定管–△A 空白管) ÷Cpr
- 按照样本质量计算
ADH (μmol/min/g 鲜重) =[(△A 测定管–△A 空白管)÷ε÷d×V 反总×106] ÷(W×V 样÷V 样总)÷T
- 按细胞数量计算
ADH (μmol/min/104cell) = [(△A 测定管–△A 空白管)÷ε÷d×V 反总×106] ÷(细胞数量×V 样÷V 样总)÷T
=1.61×(△A 测定管–△A 空白管) ÷细胞数量
- 按液体体积计算
ADH (μmol/min/mL) = [(△A 测定管–△A 空白管)÷ε÷d×V 反总×106] ÷V 样÷T
=1.61×(△A 测定管–△A 空白管)
ε:NADH 摩尔消光系数,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光径,1 cm;V 反总:反应体系总体积,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;V 样:加入反应体系中上清液体积,100μL=0.1 mL;T:反应时间,1min。
注意事项:
- 上清液蛋白质浓度需要另外测定,建议使用本公司BCA 蛋白质含量测定试剂盒。
- 配制好的试剂二 3 天使用完。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验1. 催化特点 ① 高效性 ② 专一性 键专一、基团专一、绝对或几乎绝对专一 ③ 可调节性 酶浓度调节、激素调节、共价修饰调节、限制性蛋白酶的水解作用与酶活调节、抑制剂的调节、反馈调节、金属离子和其他小分子化合物的调节。 2. 影响酶活因素 ①. 酶活测定方式 测定酶活,必须了解酶催化反应总的反应式,而且分析程序必须能够测定底物的消失或产物的生产。还需考虑辅助因子、酶的最适pH值和最适温度。 ②. 酶联测定法 过氧化物酶和它的共底物或辅酶必须过量,使酶联测定不属于限速步骤。 ③ 酶
针对同一指标,生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗?
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律,但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应,其反应过程可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图,如下所示: 延迟区:无规律可寻。 等速区:对应的是速率法,一般应用于酶活力的检测。 过渡区:对应的是固定时间法,目的是解决某些化学反应的非特异性问题,提高准确度。 平衡区:对应的是终点法,主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
快速解酒,还可减轻酒精伤害!中国团队开发的重组益生菌,或成为新型「解酒神器」
Alcohol Consumption in Mice 的研究。研究团队设计出了一种表达 hADH1B 的重组益生菌,该益生菌可帮助小鼠减少酒精吸收,延长酒精耐受时间及缩短急性饮酒后的恢复时间。更重要的是,该益生菌还可保护肝脏和肠道免受酒精刺激引起的急性损伤。 图 1 文献截图(来源:[2]) 喝酒之后,酒精(乙醇)会被胃肠道吸收而进入血液,然后通过血液循环到达肝脏,在肝脏中,乙醇脱氢酶(ADH)负责将乙醇(酒精)催化为乙醛,然后在肝脏中的醛脱氢酶(ALDH)催化的反应中迅速转化为二氧化碳和水。人们喝酒
技术资料









