- ￥160
- 博尔森/BIOESN
- 中国/上海
- BES-20040CCM
- 2025年10月29日
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- 文献和实验
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20
- 供应商：
上海博尔森生物
- 规格：
500 ml
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文献和实验家兔椎间盘(intervertebral disc )细胞的体外培养方法
Material and method：Material :1、培养皿、培养瓶、烧瓶、试管等。2、分离组织需要的眼科剪子、眼科镊子。3、5%CO2孵箱、PH计、95%氧气源。4、36电动恒温水浴。5、培养液、各种缓冲液及添加剂DMEM高糖培养基、Hank’s缓冲液 、20%胎牛血清，转换生长因子（TGF-β1）(5ng/mL)、胰岛素-转铁蛋白-硒（10ug/mL胰岛素，5ug/mL转铁蛋白，和0.5ng/mL亚硒酸盐）青霉素100U/Ml，链霉素100U/ml 。6、消化液 胶原
、饱和湿度的细胞孵育箱静置培养，使其贴壁，4小时后追加20%胎牛血清的DMEM高糖培养液4.5ml/瓶，约48小时后组织块周围有星形细胞长出.80至96小时组织块周围有大量细胞长出，去除组织块，继续培养36-48小时，待细胞汇合铺满瓶底后用含0.125%胰蛋白酶、0.02%EDTA的消化液消化细胞进行传代，取用第二代细胞进行进一步鉴定和实验。
-8的原理跟MTT其实是相同的，不同之处在于CCK-8法生成的formazan是水溶性的，不需要再吸出培养液加入有机溶剂溶解这个步骤，因此可以减少一定的误差。其他优点就是重复性优于MTT；对细胞毒性小；为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。但是CCK-8比MTT的价格要贵不少，所以一般来说，还是MTT法用的多。MTT和CCK-8（上海同仁）的原理基本是一致的，但也存在如下的区别：1、常规操作的MTT法受药物本身的颜色、培养基的颜色、血清的浓度使结果的变异较大。如采用潘兴瑜的MTT改进法将有效的降低试验的飘变率
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