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- XK-SJH-A226
- 国产
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Peroxidase (POD) kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/96样
过氧化物酶(Peroxidase，POD)试剂盒说明书
微量法 100 管/96 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：
POD（EC 1.11.1.7）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。测定原理：
POD 催化H2O2 氧化特定底物，在 470nm 有特征光吸收。需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水试剂的组成：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存； 试剂一：液体 25mL×1 瓶，4℃保存； 试剂二：液体 100μL×1 支，4℃保存； 试剂三：液体 100μL×1 支，4℃保存。粗酶液提取：1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量
（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 470nm，蒸馏水调零。
2、 工作液的配制：临用前将试剂一、试剂二、试剂三按照 2.6（mL）：1.5（μL）：1（μL）的比例混匀；在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）预热 10min 以上；现配现用。
3、 在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本和 190μL 工作液，混匀，记录 470nm 下
1min 时吸光值 A1 和 2min 后的吸光值 A2。计算 ΔA＝A2-A1。
注意：
如果 ΔA 小于 0.005，可将反应时间延长到 5min。如果 ΔA 大于 0.5，可将样本用提取液稀释后测定，计算公式中乘以相应稀释倍数。
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POD 活性计算：
用微量石英比色皿测定的计算公式如下1、血清（浆）POD 活性
单位定义：每 mL 血清（浆）在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 为一个酶活力单位。计算公式：
POD（U/mL）=ΔA×V 反总÷V 样÷0.01÷T =2000×ΔA
2、组织、细菌或细胞 POD 活性
(1) 按样本蛋白浓度计算
单位定义：每 mg 组织蛋白在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 为一个酶活力单位。
POD（U/mg prot）＝ΔA×V 反总÷（V 样×Cpr）÷0.01÷T =2000×ΔA÷Cpr
- 按样本鲜重计算
POD（U/g 鲜重）＝ΔA×V 反总÷(W× V 样÷V 样总)÷0.01÷T =2000×ΔA÷W
- 按细菌或细胞密度计算
POD（U/104 cell）＝ΔA×V 反总÷(500×V 样÷V 样总)÷0.01÷T =4×ΔA
V 反总：反应体系总体积，0.2mL； V 样：加入样本体积，0.01mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，1 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量；500： 细菌或细胞总数，500 万。
用 96 孔板测定的计算公式如下
1、血清（浆）POD 活性单位定义：每 mL 血清（浆）在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.005 为一个酶活力单位。
POD（U/mL）=ΔA×V 反总÷V 样÷0.005÷T =4000×ΔA
2、组织、细菌或细胞 POD 活性
(1) 按样本蛋白浓度计算
单位定义：每 mg 组织蛋白在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.005 为一个酶活力单位。
POD（U/mg prot）＝ΔA×V 反总÷（V 样×Cpr）÷0.005÷T =4000×ΔA÷Cpr
- 按样本鲜重计算
POD（U/g 鲜重）＝ΔA×V 反总÷(W× V 样÷V 样总)÷0.005÷T =4000×ΔA÷W
- 按细菌或细胞密度计算
POD（U/104 cell）＝ΔA×V 反总÷(500×V 样÷V 样总)÷0.005÷T =8×ΔA
V 反总：反应体系总体积，0.2mL； V 样：加入样本体积，0.01mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，1 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量；500： 细菌或细胞总数，500 万。
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文献和实验一、原理AsA-POD催化AsA与H2O2反应，使AsA氧化成单脱氢抗坏血酸（MDAsA）。随着AsA被氧化，溶液中290nm波长下的消光值（A290）下降，根据单位时间内A290减少值，计算AsA-POD活性。AsA氧化量按消光系数2.8（mmol/L）/cm计算，酶活性可用每克鲜重每小时氧化AsA的微摩尔数μMol/g·H表示。二、仪器离心机；紫外分光光度计；研钵；试管。三、试剂50mmol/L K2PO4－KH2PO4缓冲液（PH7.0，内含0.1mmol/L EDTA-Na2）
实验原理 AsA-POD催化AsA与H2O2反应，使AsA氧化成单脱氢抗坏血酸（MDAsA）。随着AsA被氧化，溶液中290nm波长下的消光度值（A290）下降，根据单位时间内A290减少值，计算AsA-POD活性。AsA氧化量按消光系数2.8(mmol/L)/cm计算，酶活性可用μmolAsA/(g FW•h)表示。 实验试剂 50mmol/L K2HPO4-KH2PO4缓冲液（pH7.0，内含0.1mmol/L
上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人髓过氧化物酶 ( MPO )ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和唾液、尿液、生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 MPO 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 MPO与单抗结合，加入生物素化的抗人 MPO ，形成
