- ￥340
- Xkbio
- XK-SJH-A525
- 国产
- 2025年07月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Neutral Xylanase Assay Kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/24样
中性木聚糖酶（Neutral Xylanase，NEX）测定试剂盒说明书
分光光度法 50 管/24 样注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶，可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及 β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应用于酿造和饲料工业中，NEX 一般分离自最适生长pH 为 6-8 的微生物。
测定原理
NEX 在中性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，在沸水浴条件下进一步与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在 540nm 处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率，可计算 NEX 活力。自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、恒温水浴锅，可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿和蒸馏水。试剂组成和配制
缓冲液：液体 65mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：液体 10mL×1 瓶，4℃避光保存。（若出现白色絮状或颗粒状沉淀，可 60℃加热溶解后使用）。
试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃避光保存。
粗酶提取
- 发酵液：发酵液于 8000g，4℃，离心 15min，取上清，作为待测样品。
- 酶干粉：称约 0.1mg，加 1mL 缓冲液溶解待测。
- 组织样本：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g
测定操作表
| 对照管 | 测定管 | |
| 样品（μL） | 200 | 200 |
| 缓冲液（μL） | 300 | 300 |
| 试剂一（μL） | 200 | |
| 试剂二（μL） | 300 | |
| 混匀，盖紧瓶盖，50℃水浴，反应 30min，立即沸水浴 20min 灭活。(注意不要让盖子爆开， 以免进水，改变了反应体系) |
||
| 试剂一（μL） | 200 | |
| 试剂二（μL） | 300 | |
| 混匀，沸水浴显色 5min(注意不要让盖子爆开，以免进水改变了反应体系)，1mL 玻璃比色 皿，540nm 处测定吸光值A，计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。 相关图片：   |
||
标准曲线：y = 1.6904x + 0.0058，R2 = 0.9989
- 按液体体积活力计算：
NEX 活力（nmol/min/mL）= （ΔA-0.0058）÷1.6904÷150÷T ×稀释倍数×10 6
- 按蛋白浓度计算：
NEX 活力（nmol/min/mg prot）= （ΔA -0.0058）÷1.6904÷150÷T ×稀释倍数×10 6÷Cpr
= 657×(ΔA -0.0058 ) ÷Cpr
- 按鲜重计算：
NEX 活力（nmol/min/g 鲜重）= （ΔA -0.0058）÷1.6904÷150÷T ×稀释倍数×10 6÷W
= 657×(ΔA -0.0058 ) ÷W
150：木糖的分子量；T：反应时间，30min；稀释倍数=V 反总÷V 样=1000µL÷200µL=5 ；
106：转化因子，即 1mg/mL=106ng/mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
注意事项
- 吸光度变化应该控制在 0.01~0.8 之间，否则加大样品量或稀释样品，注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变；也可以延长或者缩短反应时间。
- 试剂盒 2-8℃保存，保质期 3 个月，建议尽快使用。
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文献和实验启动因子并孵育一段时间后开始，持续1-3min，一般应用于酶类项目，可以使用因数法来计算待测浓度。 生化检测原理示意图 过渡区对应是固定时间法，是终点法中存在一种特殊情况，指在时间-吸光度曲线上选择两个读数点，此两点既非反应初始吸光度亦非平衡点吸光度，这两点的吸光度差值用于结果计算。目的是解决某些化学反应的非特异性问题，提高准确度。 平衡区对应的是终点法，按测光点的个数分为：一点终点法、两点终点法。 一点终点法是指在反应到达平衡点，即在时间-吸光度曲线上吸光度不再改变时，选择一个测光点计算待测
生化检测，又称临床化学，是在研究人体健康和疾病的生物化学过程变化的基础上，利用化学、生物学、病理学、免疫学、生物化学的理论与技术，通过检测人体血液、尿液、脑脊液等样本中化学物质的量与质的变化，为临床医生或研究者提供疾病诊断、病情监测等信息。 生化检测试剂盒，则为生化检测提供了便捷——将测定特定指标所需要的试剂制成可直接使用或简单配制即可使用的固体或液体，为广大科研工作者省去查询文献资料、采购各种化学试剂、摸索试验条件、优化实验体系等所需要的时间和精力，同时，也大大节约了样本量，获得更可靠
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1）。在过去的二十年里，研究报道了很多环境毒物通过对肠道微生物群、能量摄入或脂肪生成的影响，从而与肥胖的发展有关。然而，几乎没有研究报道农药或者试剂通过抑制能量消耗和/或棕色脂肪组织产热导致肥胖的作用。研究内容CPF 抑制棕色脂肪细胞中的产热基因和线粒体呼吸首先，研究者挑选了 34 种在农业、食品加工和包装中常用的化学试剂，在带有 Ucp1-荧光素酶报告基因的小鼠永生化棕色脂肪细胞中检测了这些化学试剂对 Ucp1 表达的影响。在检测的 34 种化学物质中，只有农药 CPF 显著降低 Ucp1 启动子活性
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