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- 国产
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
Catalase (CAT) kit (ultraviolet absorption method)
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/96样
过氧化氢酶（Catalase，CAT）试剂盒说明书
微量法 100 管/96 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是最主要的 H2O2 清除酶， 在活性氧清除系统中具有重要作用。
测定原理：
H2O2 在 240nm 下有特征吸收峰，CAT 能够分解 H2O2，使反应溶液 240nm 下的吸光度随反应时间而下降，根据吸光度的变化率可计算出 CAT 活性。需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板（UV 板）、研钵、冰和蒸馏水试剂组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存； 工作液：液体 24mL×1 瓶，4℃保存； 粗酶液提取：1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量
（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
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测定步骤：
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 240nm，蒸馏水调零。2、 测定前将 CAT 检测工作液在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 10min 以上。
3、 准备 96 孔 UV 板一块（非普通酶标板，普通酶标板只能透过可见光，不能透过紫外光， 检测波长小于 340nm 务必使用 UV 板）。
4、 在微量石英比色皿或 96 孔 UV 板中加入 10μL 样本和 190μL 工作液，混匀，记录 240nm
下初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2。计算 ΔA＝A1-A2。
注意事项：出现负值怎么办？
首先检查吸光值是否超过 3，如果超过 3 很可能是没有用 UV 板，请换用 UV 板。如果未超过 3，仍然出现负值则检查反应过程是否产生气泡，气泡多说明酶活性太高，气泡影响产生了负值，可以将样本用提取液稀释 10 倍后再检测。如果稀释样本或反应体系没有产生气泡仍然出现较小的负值，说明该样本测不到该酶活。- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
单位的定义：每毫升血清（浆）每分钟催化 1nmol H2O2 降解定义为一个酶活力单位。
CAT(nmol/min/mL)= [ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷V 样÷T=459×ΔA 2、组织、细菌或细胞中 CAT 活力计算：
- 按样本蛋白浓度计算：
CAT(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=459×ΔA÷Cpr
- 按样本鲜重计算：
CAT(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(W× V 样÷V 样总)÷T=459×ΔA÷W
- 按细菌或细胞密度计算：
CAT(nmol/min/104 cell)＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷（500×V 样÷V 样总）÷T =0.917×ΔA
V 反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：H2O2 摩尔消光系数，4.36×104 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V 样：加入样本体积，0.01 mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，1 min；W：样本质量，g；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；500：细胞或细菌总数， 500 万。
- 用 96 孔板测定的计算公式如下
单位的定义：每毫升血清（浆）每分钟催化 1nmol H2O2 降解定义为一个酶活力单位。
CAT(nmol/min/mL)=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷V 样÷T=918×ΔA 2、组织、细菌或细胞中 CAT 活力计算：
- 按样本蛋白浓度计算：
CAT(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr) ÷T =918×ΔA÷Cpr
- 按样本鲜重计算：
CAT(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷（W× V 样÷V 样总）÷T=918×ΔA÷W
- 按细菌或细胞密度计算：
CAT(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷（500×V 样÷V 样总）÷T=1.836×ΔA
V 反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：H2O2 摩尔消光系数，4.36×104 L / mol /cm；d：96 孔板光径，0.5cm；V 样：加入样本体积，0.01 mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T： 反应时间，1 min；W：样本质量，g；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；500：细胞或细菌总数，500 万。
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文献和实验上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人过氧化氢酶 ( CAT )ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液、唾液生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 CAT 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 CAT与单抗结合，加入生物素化的抗人 CAT ，形成免疫复合
大鼠过氧化氢酶（ CAT ） 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本 中 过氧化氢酶（CAT ） 的活性。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠 过氧化氢酶（ CAT ） 水平。用纯化的 过氧化氢酶（ CAT ） 抗体 包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入 过氧化氢酶（ CAT ） ，再与 HRP 标记的 过氧化氢酶
实验原理 H2 O2 在240nm波长下有强烈吸收，过氧化氢酶能分解过氧化氢，使反应溶液吸光度(A240 )随反应时间而降低。根据测量吸光率的变化速度即可测出过氧化氢酶的活性。 实验试剂 0.2mol/L pH7.8磷酸缓冲液（内含1%聚乙烯吡咯烷酮）； 0.1mol/L H2 O2 （用0.1mol/L高锰酸钾标定）。 实验设备 紫外
