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48T
人自噬相关蛋白LC3-II(LC3-II)ELISAKIT采用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被猪瘟抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗原,经过温育并彻底洗涤。人自噬相关蛋白LC3-II(LC3-II)ELISAKIT保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用.严格按照人自噬相关蛋白LC3-II(LC3-II)ELISAKIT说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。人自噬相关蛋白LC3-II(LC3-II)ELISAKIT所有液体组分使用前充分摇匀。
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文献和实验*发表【中文论文】请标注:由上海酶研生物科技有限公司提供;
*发表【英文论文】请标注:From Shanghai EK-Bioscience Biotechnology Co., Ltd.
Autophagy Monitoring Assay: Qualitative Analysis of MAP LC3-I to II Conversion by Immunoblot
within lysosomes. Dysregulation of the autophagy-lysosomal degradation pathway is an example of lysosomal dysfunction associated with exposure to some nanomaterials. Here, we present a method to monitor autophagy by measurement the autophagosome marker LC3-II
点相当于一个自噬体,可以通过计数来评价自噬活性的高低。 3. 利用 Western Blot 检测 LC3-II/I 比值的变化以评价自噬形成 自噬形成时,胞浆型 LC3(即 LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即 LC3-II),因此,LC3-II/I 比值的大小可估计自噬水平的高低。 LC3 抗体对 LC3-II 有更高的亲和力,会造成假阳性。方法 2 和 3 需结合使用,同时需考虑溶酶体活性的影响。 4. MDC 染色 MDC 染色
多功能蛋白,除了接受自噬信号,它还可以接受很多其它的信号对自噬进行调节。 3) P53 信号通路:在细胞核中,P53 能与多种蛋白作用,如 sestrin1/2 蛋白、DAPK1、BCL-2 家族、DRAM1 等作用,发挥上调细胞的自噬水平功能。而在细胞质中,P53 能够发挥抑制细胞自噬水平的功能。 自噬检测: LC3 是自噬标志物,自噬形成时,胞浆型 LC3(即 LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即 LC3-II),LC3-II/I 比值的大小可估计自噬
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