异丙基-b-D-硫代半乳糖苷 IPTG

产品货号：0487

储存温度：-20℃

 

产品描述

IPTG为安慰性诱导物，X-gal为生色底物，二者共同用于蓝白斑筛选。当pUC系列的载体DNA（或其他带有lacZ 基因载体DNA）以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑选出基因重组体。此外，它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。IPTG也是常用的基因工程中重组蛋白表达的诱导剂。

 

产品性质

中文别名（Chinese synonym）	异丙基-β-D-硫代半乳糖苷
英文别名（English synonym）	IPTG Solution
CAS号（CAS NO.）	367-93-1
分子式（Formula）	C9H18O5S
分子量（Molecular weight）	238.3
外观（Appearance）	白色粉末
纯度（Purity）	≥99%
溶解性（Solubility）	溶于水（100 mg/mL）
结构式（Structure)

 

储存液配制 

1）称取 0.238 g IPTG；加入 10 mL 去离子水充分溶解 IPTG 粉末，配制 0.1 M 的储存液；

2）用 5-10 mL 去离子水润湿 0.22 μm 针孔过滤；

3）0.22 μm 滤膜除菌上述 IPTG 溶液。分装成 1 mL，-20℃冻存，有效期可达 1 年。

 

蓝白斑筛选

1. X-Gal、IPTG 加入琼脂培养基溶液

1）高压灭菌已加琼脂的培养基，并冷却到 50℃左右。

2）每毫升培养基内加入 10 μL 20 mg/mL X-gal 溶液、10 μL 0.1 M 的 IPTG（使其终浓到 1mM）；

3）加入适量抗生素；

4）混匀后按照平板大小倒入适量培养基，待培养基冷却至室温后，接种细菌于 37℃过夜培养。

2. X-Gal、IPTG 加到琼脂平板表面

1）于无菌超净工作台制备平板（如 LB 琼脂板）；

2）取 40 μL 0.1 M IPTG 和 120 μL 20 mg/mL X-gal 混合，均匀地涂布于准备好的平板上；

【注】：平板边缘较难充分涂布均匀，容易产生假阳性，因此，为了得到更好结果， 建议后续操作中尽可能在平板中间挑取单克隆。

3）37℃孵育直至所有液体被吸收（30 min 或更长）。接种细菌于 37℃过夜培养直到菌落形成。

 

注意事项

1）含有 IPTG 的培养基 4℃避光保存，须在 1 周内使用。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3）本品仅用于实验研究。