冻存管,PP,5ml,内旋帽,无菌

细胞培养从头学——入门篇

、擦桌子、超净工作台等，然后用3‰来苏尔或新洁尔灭或0.5％过氧乙酸擦拭。 2.CO2孵箱（培养箱）灭菌：先用3‰新洁尔灭擦拭，然后用75％酒精擦拭或者0.5％过氧乙酸，再用紫外灯照射。 3.实验前灭菌：打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各20-30分钟。 4.实验后灭菌：用75％酒精（3‰新洁尔灭）擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台。 （二）实验人员的无菌准备 1.肥皂洗手。 2.穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋。 3.用75％酒精棉球擦净双手

细胞培养的操作步骤

)，在冻存前1d换液。 （2）按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×107／ml左右密度，离心，去上清。 （3）加入配制好的冻存液（培养液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml），按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO) 或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外。 （4）分装于无菌冻存管中，每管加1.5m悬液。 （5）旋好冻存管并仔细

（原创）蛋白质的双向电泳实验方法 （请加分）

溶液（在IEF结束前1小时）。使用之前，在20ml平衡溶液中加入0.2g DTT。2．IEF结束后，移去管子中的阳性和阴性溶液。3．用87％的甘油溶液覆盖帽（cap）凝胶一侧。4．加5ml平衡溶液到Petri盘。5．用PP线挤出凝胶：PP线从帽凝胶一侧插入，管子加样一侧浸入去离子水，小心地向下挤出凝胶。与此同时可看到水中的覆盖液的溶解。凝胶被拉出5min后，用水迅速清洗挤压端。然后将管子保持在盛有平衡溶液的Petri-盘子上，整个凝胶被PP线拉到盘子里。每个盘子里可平衡两块胶。6．室温振荡平衡凝胶